产品名称：PC-9 
商品货号：MZ-0668 
中文名称：人肺腺癌细胞 
规格：T25 
组织来源：肺腺癌；男性 
形态特征：上皮样 
生长特性：贴壁生长 
细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 
培养条件：RPMI1640+10%FBS 
传代方法：1：2传代 
冻存条件：无血清细胞冻存液 
细胞传代步骤：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 
细胞复苏步骤：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 
细胞冻存步骤：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 

T25方瓶
说明书

一、 收到细胞处理方法 1、 收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置若干小时（视细胞密度而 定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同 倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏 液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100×，200×各一张），观察记录细胞 在运输过程中是否有污染情况。 2、 收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费重发一次细胞。 3、 收到细胞后，可将培养瓶里多余的培养基收集放置于 4℃备用。刚开始培养时， 建议用瓶内的培养基，可补加 2%的血清，待细胞状态恢复后，培养液一半用瓶 内的，一半用客户自备的，使细胞逐渐适应培养条件，以免因不适应而造成生长 状态不佳。
二、细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？ 1、 细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发； 2、 细胞污染问题，请在收到产品 24 小时内，给我们提出真实的实验结果，核实后 重发； 3、 常温发货的细胞静置 24 小时后，绝大多数细胞未存活（需提供真实清晰的细胞 状态照片），重发； 4、 干冰冻存发货的细胞复苏后，绝大多数细胞未存活（需提供真实清晰的细胞状态照 片），重发； 5、 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时或常温发货的细胞静置4小时后并且未开封， 出现污染，重发； 6、 细胞活性问题，请在收到产品 7 天内给我们提出真实的实验结果（用台盼蓝染色法 鉴定细胞活力），核实后予重发； 7、 视具体情况而定