外泌体(Exosome)是由不同细胞分泌的直径 30-150nm 的胞外膜性囊泡。外泌体内容物丰富,包括蛋白质、脂质和核酸等,在细胞间信息交流中发挥着重要作用,并与多种疾病的发生、发展、治疗及预后密切相关。
作为天然的胞间信息载体,外泌体免疫原性低,生物相容性高,在人体血液中比较稳定。能够利用增强渗透滞留效应(Enhanced Permeation and Retention effect,EPR),有选择性的渗透和滞留在肿瘤或炎症组织部位,可穿透血脑屏障等。不仅可以通过其内源内容物直接对受体细胞进行治疗,也可以作为药物载体,递送化学药物、蛋白质、多肽及基因药物,在医疗领域具有巨大的应用潜力。
为了增强外泌体的治疗效果,降低对正常细胞的毒害,需提高外泌体的靶向递送能力,目前科研常用方法是基因改造分泌外泌体的细胞,利用重组克隆质粒,在细胞中表达靶向蛋白或多肽-外泌体膜蛋白复合体,收集释放的外泌体,来获得靶向外泌体,但该方法修饰效率低,且部分细胞转染困难,难以大规模制备。生物素和链霉亲和素之间具有极高的亲和能力,反应高度专一,形成复合物的解离常数很小,呈不可逆反应性,产物稳定性高,目前生物素-亲和素系统在生物领域已成为了一种通用普适的研究方法。
本试剂盒通过化学连接的方法,直接将生物素以共价键方式偶联在外泌体表面,再采用SEC 分子排阻柱将游离的生物素去除,得到大量纯净的生物素修饰外泌体。生物素修饰的外泌体可以通过链霉亲和素,与任何带生物素标记的蛋白,多肽或小分子进行连接,实现外泌体蛋白,多肽,小分子表面修饰。
本试剂盒生物素修饰效率高,反应条件温和,生理条件下即可发生反应,反应特异性好,无有害副产物,不损伤外泌体膜结构,也不影响外泌体的生物活性和功能,可实现生物素外泌体的大规模制备。