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小鼠促肾上腺皮质激素释放激素(
CRH)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用
目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆、组
织匀浆及相关液体样本中促肾上腺皮质激素释放激素(
CRH)的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠促肾上腺皮质激素释放激素(
CRH)水平。
用纯化的小鼠促肾上腺皮质激素释放激素(
CRH)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往
包被的微孔中依次加入小鼠促肾上腺皮质激素释放激素(
CRH),再与 HRP 标记的检测抗体结
合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催
化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠促肾上腺
皮质激素释放激素(
CRH)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(
OD 值),通过
标准曲线计算样品中小鼠促肾上腺皮质激素释放激素(
CRH)含量。
试剂盒组成:
试剂盒组成
48 孔配置
96 孔配置
保存
说明书
1 份
1 份
封板膜
2 片
2 片
密封袋
1 个
1 个
酶标包被板
1×48
1×96
2-8℃保存
标准品
0.3ml×6 管
0.3ml×6 管
2-8℃保存
酶标试剂
5 ml×1 瓶
10 ml×1 瓶
2-8℃保存
样品稀释液
3 ml×1 瓶
6 ml×1 瓶
2-8℃保存
显色剂 A 液
3 ml×1 瓶
6 ml×1 瓶
2-8℃保存
显色剂 B 液
3 ml×1 瓶
6 ml×1 瓶
2-8℃保存
终止液
3 ml×1 瓶
6 ml×1 瓶
2-8℃保存
20×浓缩洗涤液
15ml×1 瓶
25ml×1 瓶
2-8℃保存
注:标准品浓度依次为:80、40、20、10、5、0 pg/mL.
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固 10-20 分钟,离心 20 分钟左右(
2000-3000 转/分)。仔细收集
上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心
20 分钟左右(
2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次
离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心 20 分钟左右(
2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右