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pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template (RNA体外转录质粒)
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  • 货号 D2308-10μg
  • 品牌 Beyotime/碧云天 ( 生产厂家 )
  • CAS号 见包装
  • 规格/包装 10μg
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碧云天研发的pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template是一种用于体外基于T3、SP6或T7 Promoter进行RNA转录的线性化质粒模板。该质粒中的PstI/SacI位点反向插入了人β-actin基因的125bp cDNA片段(X00351的823-947核苷酸片段),已经用HindIII限制性内切酶进行了线性化处理,可以直接使用T3 RNA聚合酶、SP6 RNA聚合酶或T7 RNA聚合酶的任何一种进行体外转录。从本线性化模板可以转录产生与人β-actin mRNA互补的RNA探针,也可以用于测定T3 RNA聚合酶、SP6 RNA聚合酶或T7 RNA聚合酶的活性。

当使用T3 RNA聚合酶、SP6 RNA聚合酶或T7 RNA聚合酶进行体外转录时,获得的RNA的长度分别为221nt、198nt和175nt。推荐使用碧云天生产的R7006 SP6 RNA PolymeraseR7009 T3 RNA PolymeraseR7012 T7 RNA Polymerase

从该模板合成的转录产物可用作核糖核酸酶和S1核酸酶保护试验的探针;在Northern和Dot blots中可作为内参或用于建立每个样品中RNA相对量的参考;与人总RNA杂交可保护人β-actin mRNA的125个核苷酸片段不被RNase A和RNase T1消化。

pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
Ampicillin promoter 96-200
Ampicillin resistance ORF 201-1061
ori 1232-1820
lac promoter 2144-2174
lac operator 2182-2198
M13 reverse primer binding site 2206-2222
T3 promoter 2238-2257
SP6 promoter 2261-2280
T7 promoter 2284-2303
β-actin-125-Human Antisense Template 2327-2451
Multiple cloning site 2307-2326/2452-2480
M13 forward primer binding site 2484-2500

pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template质粒(2878bp)的图谱如下:

pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template的多克隆位点的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2308 pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template (RNA体外转录质粒).pdf

pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template)包括:

AatII G,ACGT`C 65 KasI G`GCGC,C 2639
Acc65I G`GTAC,C 2315 KpnI G,GTAC`C 2135
AflIII A`CRYG,T 1876 NarI GG`CG,CC 2640
AhdI GACNN,N`NNGTC 987 NdeI CA`TA,TG 2692
AlwNI CAG,NNN`CTG 1464 NmeAIII GCCGAG(N)19,NN` 838
AvaI C`YCGR,G 2458 NotI GC`GGCC,GC 2308
BamHI G`GATC,C 2463 PciI A`CATG,T 838
BanII G,RGCY`C 2452 PluTI G,GCGC`C 2308
BcgI ,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN` 450 PstI C,TGCA`G 1876
BmgBI CAC|GTC 2374 SacI G,AGCT`C 2639
BpmI CTGGAG(N)14,NN` 917 SacII CC,GC`GG 2321
BsaI GGTCTCN`NNNN, 922 SapI GCTCTTCN`NNN, 2452
BsaXI ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` 2008 ScaI AGT|ACT 2312
BseYI C`CCAG,C 1527 SfoI GGC|GCC 1993
BsoBI C`YCGR,G 2458 SmaI CCC|GGG 507
BspQI GCTCTTCN`NNN, 1993 SspI AAT|ATT 2461
BsrFI R`CCGG,Y 903 TspMI C`CCGG,G 2460
BstAPI GCAN,NNN`NTGC 2693 XbaI T`CTAG,A 183
BtgI C`CRYG,G 2311 XmaI C`CCGG,G 2458
EagI C`GGCC,G 2308 XmnI GAANN`NNTTC 388
Eco53kI GAG|CTC 2454 ZraI GAC|GTC 67
EcoO109I RG`GNC,CY 8
EcoRI G`AATT,C 2232

pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template的全序列信息:D2308 pT3_SP6_T7 RNA Template (Linearized)全序列.txt

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