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pT7-N-His-WELQ
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货号
D5008-1μg
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品牌
Beyotime/碧云天
(
生产厂家
)
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CAS号
见包装
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规格/包装
1μg
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单位
件
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储存条件
-20℃
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现货状态
三个工作日
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产品详情
商家描述
包装清单
操作手册
商家资质信息
pT7-N-His-WELQ是碧云天研发的一种用于表达N端含有His标签(His tag)融合蛋白的原核表达质粒。本质粒N端His标签后含有WELQ Protease (P2311)酶切位点,可通过WELQ Protease切除N端的His标签。
本质粒含有T7启动子/lac操纵子,可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG) (ST098/ST1416)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点的前面,带有一个His标签的编码序列,含有6个组氨酸(6X His)。因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有His标签的目的蛋白。
本质粒在His标签后含有WELQ Protease识别的四肽序列W-E-L-Q↓X (Trp-Glu-Leu-Gln↓X,X为任意氨基酸),该识别位点上含有Pst Ⅰ酶切位点,便于构建不含有额外氨基酸的融合蛋白。因此,可以利用WELQ Protease酶切除去目的蛋白N端的His标签,且目的蛋白N端不会保留额外的氨基酸[1]。
通常可以采用如BeyoGold™ His-tag Purification Resin (P2210/P2218/P2220)或His标签蛋白纯化试剂盒(P2226)等纯化本质粒表达的目的蛋白,也可以使用His-tag抗体(AH367)检测和少量地分离纯化目的蛋白。
本质粒为卡那霉素抗性。
pT7-N-His-WELQ质粒(5301bp)的图谱如下:
pT7-N-His-WELQ质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide
|
Position
|
f1 origin
|
12-467
|
Kanamycin resistance ORF
|
560-1375
|
pBR322 origin
|
1497-2085
|
lacI coding sequence
|
3515-4597
|
lacI promoter
|
4598-4675
|
T7 promoter
|
4988-5006
|
lac operator
|
5007-5031
|
His tag coding sequence
|
5079-5096
|
WELQ site
|
5109-5120
|
Multiple cloning site (PstI-XhoI)
|
5115-5162
|
T7 Terminator
|
5229-5276
|
pT7-N-His-WELQ的多克隆位点的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D5008 pT7-N-His-WELQ.pdf
pT7-N-His-WELQ中没有的酶切位点包括:
AarI
|
AatII
|
AbsI
|
Acc65I
|
AflII
|
AgeI
|
AhdI
|
AleI
|
AscI
|
AvrII
|
BaeI
|
BbvCI
|
BfuAI
|
BmgBI
|
BmtI
|
BplI
|
BsaI
|
BseRI
|
BsiWI
|
BspMI
|
BsrGI
|
BstBI
|
Bsu36I
|
CspCI
|
DraI
|
EagI
|
Eco53kI
|
FalI
|
FseI
|
I-CeuI
|
I-PpoI
|
I-SceI
|
KflI
|
KpnI
|
MauBI
|
MfeI
|
MreI
|
MscI
|
NcoI
|
NheI
|
NotI
|
PacI
|
PasI
|
PI-PspI
|
PI-SceI
|
PmeI
|
PmlI
|
PspXI
|
PsrI
|
RsrII
|
SacI
|
SacII
|
SbfI
|
ScaI
|
SexAI
|
SfiI
|
SgrDI
|
SnaBI
|
SpeI
|
SrfI
|
StuI
|
SwaI
|
ZraI
|
pT7-N-His-WELQ中的单酶切位点包括:
AcuI
|
CTGAAG(N)14,NN`
|
1599
|
NmeAIII
|
GCCGAG(N)18-19,NN`
|
4042
|
AlwNI
|
CAG,NNN`CTG
|
1732
|
NruI
|
TCG|CGA
|
1286
|
ApaI
|
G,GGCC`C
|
4039
|
PaeR7I
|
C`TCGA,G
|
5157
|
AsiSI
|
GCG,AT`CGC
|
945
|
PciI
|
A`CATG,T
|
2141
|
BamHI
|
G`GATC,C
|
5121
|
PflFI
|
GACN`N,NGTC
|
2399
|
BclI
|
T`GATC,A
|
4228
|
PpuMI
|
RG`GWC,CY
|
3136
|
BglI
|
GCCN,NNN`NGGC
|
3185
|
PshAI
|
GACNN|NNGTC
|
3401
|
BglII
|
A`GATC,T
|
5151
|
PsiI
|
TTA|TAA
|
370
|
BlpI
|
GC`TNA,GC
|
5218
|
PspOMI
|
G`GGCC,C
|
4035
|
BspQI
|
GCTCTTCN`NNN,
|
2258
|
PstI
|
C,TGCA`G
|
5119
|
BssHII
|
G`CGCG,C
|
3831
|
PvuI
|
CG,AT`CG
|
945
|
BssSaI
|
C`ACGA,G
|
1968
|
SalI
|
G`TCGA,C
|
5145
|
BstAPI
|
GCAN,NNN`NTGC
|
4566
|
SapI
|
GCTCTTCN`NNN,
|
2258
|
BstEII
|
G`GTNAC,C
|
4060
|
SgrAI
|
CR`CCGG,YG
|
4923
|
BstZ17I
|
GTA|TAC
|
2374
|
SmaI
|
CCC|GGG
|
1069
|
DraIII
|
CAC,NNN`GTG
|
245
|
SphI
|
G,CATG`C
|
4775
|
EcoRI
|
G`AATT,C
|
5133
|
StyI
|
C`CWWG,G
|
5240
|
EcoRV
|
GAT|ATC
|
5141
|
TatI
|
W`GTAC,W
|
2337
|
FspI
|
TGC|GCA
|
3164
|
TspMI
|
C`CCGG,G
|
1067
|
FspAI
|
RTGC|GCAY
|
3164
|
Tth111I
|
GACN`N,NGTC
|
2399
|
HindIII
|
A`AGCT,T
|
5127
|
XbaI
|
T`CTAG,A
|
5034
|
HpaI
|
GTT|AAC
|
3740
|
XhoI
|
C`TCGA,G
|
5157
|
MluI
|
A`CGCG,T
|
4242
|
XmaI
|
C`CCGG,G
|
1067
|
NdeI
|
CA`TA,TG
|
5074
|
|
|
|
pT7-N-His-WELQ质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
Forward primer (4988-5004): 5'-TAATACGACTCACTATA-3'
Reverse primer (5215-5234): 5'-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'
pT7-N-His-WELQ的全序列信息:D5008 pT7-N-His-WELQ序列.txt
包装清单:
产品编号
|
产品名称
|
包装
|
D5008-1μg
|
pT7-N-His-WELQ
|
1μg
|
D5008-100μg
|
pT7-N-His-WELQ
|
100μg
|
-
|
说明书
|
1份
|
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。