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检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被雌激素受
体(ER)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育
并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用
下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的雌激素受体(ER)呈正相关。用酶标仪
在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1.
血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液
后,3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.
血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
3.
细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
4.
组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。
5.
保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复
冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品