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http://www.whb-bio.com/h-pd-107.html#skeyword=WHB-100-UL&_pp=0_35超低吸附细胞培养板/皿/瓶
Ultra Low Adsorption Cell Culture Plates
注:该说明书方法仅适用于本公司制作的超低吸附细胞培养板/皿/瓶,您使用时,请按随货的说明书操作,如有任何疑问可咨询公司技术人员。
I 简介
超低吸附细胞培养板/皿/瓶底附着与表面共价键结合的水凝胶,能最大限度地减少细胞附着、细胞活化、蛋白质吸收和酶活化;该水凝胶对细胞无毒性作用;可用于细胞非贴壁培养、类器官、圆球体等培养物。
II 试剂与材料
超低吸附细胞培养板/皿/瓶
细胞培养液
移液枪头
37℃/5%二氧化碳培养箱
自动移液枪
恒温水浴锅
生物安全柜
III预处理(紧急情况下,此步骤可忽略)
1. 将超低吸附细胞培养板/皿/瓶外包装70-75%酒精消毒后,迅速置于生物安全柜中,撕开外包装取出培养板/皿/瓶,放置备用。
2. 紫外消毒15分钟(紧急情况下,此步骤可忽略)。
IV 细胞悬液的加入和培养
1. 准备好所培养的细胞悬液。
2. 按需将细胞悬液沿孔壁加入预处理过的超低吸附细胞培养板/皿/瓶中。
3. 铺板密度推荐
间充质干细胞:3*104个活细胞/cm2
血管内皮细胞:3*104个活细胞/cm2
Huh7/HepG2:96U型底,1000个活细胞/孔
(细胞类型不同,细胞成团的密度不同,需要研究者自行摸索最佳密度。)
4. 用细胞培养液补至总体积到推荐培养液量(见附表一)。注意:切记不能剧烈摇动培养板/皿/瓶,或者震荡培养,会破坏超低吸附水粘胶,导致细胞无法成团。
5. 将加好细胞的培养板置入37°C / 5%二氧化碳培养箱中培养,一般情况下12小时开始可成团,不同细胞类型可能成团时间不同,建议成团时间控制在12-96小时之间。
6. 48小时换液,可采用半量换液,即取出一半培养基,加入一半新鲜培养基。