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全基因组扩增试剂盒基于多重链置换扩增的Phi29 DNA聚合酶等温扩增体系,Phi29 DNA聚合酶是从Bacillus subtilis噬菌体Phi29中克隆出的嗜温DNA聚合酶,利用基因重组技术,在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。Phi29 DNA聚合酶具有很强的链置换活性,可实现对DNA复杂结构的解链与复制。同时具有高效的DNA合成能力,可连续合成多达70kb的DNA片段。Phi29 DNA聚合酶具有很强的3´→5´外切酶活性,保真度高于绝大多数高保真酶,因此Phi29 DNA聚合酶特别适合用于全基因组扩增。
本试剂盒可以实现少量DNA样本的全基因组无差别扩增,一个反应可以达到40μg的全基因组DNA。本试剂盒要求DNA样品不能严重降解,以减少因模板量太少造成不平衡扩增。扩增产物可以稀释后用于后续的DNA分析。