碧云天的Beyo3D™ Mito-Tracker Green染色液(1000X) (Beyo3D™ Mito-Tracker Green Staining Solution, 1000X)，是一种快速、便捷的用于3D培养的细胞球或类器官等的活细胞线粒体染色的溶液。仅需染色10分钟就可在荧光显微镜下观察到非常明亮的活细胞线粒体绿色荧光染色。

Mito-Tracker Green为采用Molecular Probes公司的carbocyanine进行了荧光标记的一种Mito-Tracker，也称Benzoxazolium, 2-[3-[5,6-dichloro-1,3-bis[[4-(chloromethyl)phenyl]methyl]-1,3-dihydro-2H-benzimidazol-2-ylidene]-1-propenyl]-3-methyl-, chloride。分子式为C34H28Cl5N3O，分子量为671.88，CAS number为201860-17-5，可以用作线粒体特异性的荧光探针。和Rhodamine 123或JC-1相比，Mito-Tracker Green对于线粒体的染色不依赖于线粒体膜电位。

Mito-Tracker Green最大激发光波长为490nm，最大发射波长为516nm，呈绿色荧光。

Mito-Tracker Green只可以用于对活细胞的染色，细胞经过固定后会导致荧光会消失。

本产品适用范围广。本产品可用于各种方法培养出的3D细胞球或类器官，包括超低吸附细胞培养板、Matrix-Gel™基质胶或Matrigel包被的平板、琼脂糖包被的平板、细胞悬滴培养板等。

本产品使用便捷，整个检测过程仅需约10-30分钟即可完成。对于常规的3D细胞活细胞染色，仅需加入本产品避光孵育10分钟即可进行荧光检测。本产品对3D培养的HCT-116细胞的染色效果参考图1。

图1.碧云天Beyo3D™ Mito-Tracker Green染色液(1000X) (C1435)对于3D培养的HCT-116细胞的染色效果图。5000个HCT-116细胞使用碧云天3D细胞培养包被试剂盒(U形底96孔板) (C0366)包被的U形底96孔板培养72小时，然后吸除培养液后直接加入Beyo3D™ Mito-Tracker Green染色液(1X)染色10分钟(图中各染料可混合配制后使用)。结果显示，Beyo3D™ Mito-Tracker Green对于3D细胞染色效果清晰、明亮，Beyo3D™ Mito-Tracker Green染色液染色的线粒体呈现绿色荧光(图B)，Beyo3D™ Lyso-Tracker Red染色液(1000X) (C1443)染色的溶酶体呈现红色荧光(图C)，Beyo3D™ Hoechst 33342染色液(C1345)染色的细胞核呈现蓝色荧光(图D)，绿色荧光、红色荧光及细胞核蓝色荧光的叠加(Merge)效果见图E。实际检测效果会因细胞株、实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中效果仅供参考。

传统的细胞培养大多以二维(Two-dimensional, 2D)的形式展开，但2D培养的细胞在生长方式、生长形态、分化和功能等方面都与体内生理条件下细胞的真实形态和结构存在明显差异，可能会因为细胞结构和组织形态的缺失，使实验结果的可信度降低[1-3]。三维(Three-dimensional, 3D)细胞培养能够更好地模拟体内细胞生存的微环境，更能代表体内组织，也能更真实的反映细胞与细胞间、细胞与基质间的相互作用，细胞对外源性和内源性刺激的应答也更接近于它们在体内的反应，3D细胞培养从而成为更有价值并更为可信的体外实验模型，能够获得与体内实验更加一致的实验结果[4-5]。

3D肿瘤细胞模型越来越多地被用于了解疾病机制和药物研发。2D培养的肿瘤细胞，其单侧细胞膜可以均匀地获得营养和氧气，而3D培养的肿瘤细胞团的内部细胞获得营养和氧气的机会更少，形成自然的营养和氧气梯度，能更好地模拟体内微环境条件，因此3D培养的肿瘤球状体(Spheroid)或肿瘤类器官(Organoid)等能更好地模拟体内肿瘤，更利于小分子药物筛选或者肿瘤相关分子机制的研究，也更能准确地预测药物治疗的体内反应、疗效或毒性。同时，2D肿瘤细胞模型体外扩增有一定局限性，在传代后容易丧失原肿瘤的遗传异质性，出现优势克隆选择性，从而降低临床相关性。相比于2D细胞模型，3D细胞球或者类器官很多情况下能提供更可信的研究结果，简化并加速药物评价流程。自2009年小肠类器官首次建立至今，3D细胞和类器官研究已经扩展到很多组织系统，并成为生命科学最热门的领域之一。

按照96孔板每孔需0.1μl Beyo3D™ Mito-Tracker Green染色液(1000X)，本产品每50μl可以进行500个样品的检测。

-20ºC避光保存，一年有效。

细胞球在外力的作用下容易变形或分散，PBS洗涤及换液等过程须轻缓，避免破坏或吹散3D细胞球。

Mito-Tracker Green可以用于活细胞的线粒体荧光标记，但不适合用于固定细胞的标记。

本产品浓度经过碧云天的优化，确保可以满足活细胞染色及各种常规染色的需要。如需使用特定浓度的Mito-Tracker Green，请选购碧云天的Mito-Tracker Green (线粒体绿色荧光探针) (C1048)。

荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。