碧云天的通用型ELISA溶液套装(含酶标板与封板膜) (Universal ELISA Buffer Set with Plates and Sealers)，又称ELISA辅助组分试剂盒(ELISA Ancillary Reagent Kit with Plates and Sealers)、ELISA补充溶液套装(ELISA Supplemental Solution Set with Plates and Sealers)，是一种包含了双夹心ELISA等ELISA实验过程中常用的包被液、封闭液、洗涤液、通用稀释液、TMB显色液、终止液、酶标板和封板膜的溶液套装，可满足常规ELISA的溶液需求。用户仅须自备ELISA检测用抗体(如使用生物素体系，须自备生物素检测相关试剂；如需进行绝对定量，还须自备标准品)，就可以进行ELISA检测，同时也可以配套用于R&D Systems的DuoSet™系列产品或其它类似产品。

ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)即酶联免疫吸附试验，是一种结合抗原、抗体特异性反应和酶对底物高效催化作用的高敏感性免疫学实验技术，广泛用于生物学和医学科学等的许多领域。常见的ELISA有双抗体夹心ELISA (Sandwich ELISA)、竞争ELISA (Competitive ELISA)、直接ELISA (Direct ELISA)、间接ELISA (Indirect ELISA)等。双抗体夹心ELISA，简称双夹心ELISA，是最常见的ELISA检测方式之一，可用于检测样品中靶蛋白等目标分子的浓度。靶蛋白特异的捕获抗体包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的靶蛋白会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗靶蛋白抗体(检测抗体, Detection Antibody)后，生物素化检测抗体与靶蛋白结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin, SA-HRP)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。靶蛋白浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中靶蛋白浓度[1-3]。

本产品中的包被液(Coating Buffer)，用于捕获抗体(Capture Antibody)的稀释和配制，其主要成分为磷酸盐缓冲液等。

本产品中的封闭液(Blocking Buffer)，用于ELISA实验中的封闭。其主要有效成分为经过反复优化的适量封闭试剂、一些适当的稳定试剂、防腐剂等，一方面能封闭未吸附蛋白的固相载体位点，另一方面能有效提升包被板的稳定保存时间。封闭后的包被板可以直接进行后续实验，也可制备成ELISA预包被板，对于多种抗体经测试使用本产品包被的酶标板可以在4ºC保存和使用不少于六个月，有效节约ELISA实验时间。

本产品中的通用稀释液(Universal Dilution Buffer)可以用于ELISA实验时标准品(Standard)、样品(Sample)、检测抗体(Detection Antibody)和辣根过氧化物酶标记Streptavidin (SA-HRP)的稀释和配制。其主要有效成分为经过反复优化的适量封闭试剂、防腐剂等，一方面能有效保护样品和抗体的活性，另一方面能保证反应的特异性。

本产品中的洗涤液(20X) (Wash Buffer)可以用于ELISA实验中包被、封闭、样品、检测抗体和SA-HRP孵育后的洗涤。适当的洗涤可以降低背景，增强信噪比。

本产品中的TMB显色液(TMB Substrate Solution)用于ELISA检测的显色，为即用型单组份溶液，采用了最新的单组分技术，把所有相关试剂全部配制在一个溶液中，仅由单一溶液组成，简化了操作步骤，使检测结果高灵敏度的同时更加稳定可靠。

本产品中的终止液(Stop Solution)是一种主要用于ELISA实验中TMB显色反应终止的比较安全的不含硫酸的即用型酸性溶液，使用终止液终止反应后在1小时内吸光度保持稳定。

本产品中的酶标板(96-well Plats for ELISA)是一种ELISA实验专用的高结合力酶标板，能有效提高目的蛋白的结合力，且背景信号较低。

按照每块板需要包被液10ml、封闭液30ml、洗涤液(20X) 30ml、通用稀释液50ml、TMB显色液10ml、终止液10ml、1个酶标板和4张封板膜进行计算，一个包装的本试剂盒可以进行5块96孔板的ELISA检测。

4ºC保存，一年有效。TMB显色液须避光保存。除了TMB显色液以外，其余溶液长期不使用可以-20ºC保存。高结合力酶标板(可拆卸)和封板膜(透明X10, 白色X10)也可以室温保存。

本套装产品仅提供各种溶液，以及高结合力酶标板和封板膜。目的蛋白的抗体及抗体配套试剂、封板膜刮板等需要自备，推荐选购碧云天的BeyoGold™封板膜刮板(FASA011)。

使用前，将试剂盒内的溶液从4ºC冰箱取出，恢复至室温使用。

使用时建议将各组分吸出或倒出所需用量使用，尽量避免直接从瓶中进行移液操作；未使用的多余溶液请勿倒回。

洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。

洗涤液(20X)配制成1X洗涤液后，宜4ºC保存，并在1-2个月内用完，如果室温保存，宜在1-2周内用完。

通用稀释液经过滤除菌处理，使用过程中应尽量避免细菌污染。一旦启用后建议在三个月内用完，如果发现有沉淀或细菌污染请弃用。

如果发现TMB显色液出现混浊或颜色变成蓝色，应该停止使用。

加入TMB显色液或者终止液后，如果有沉淀生成，说明样品中目的蛋白的含量过高，建议适当稀释后再进行测试。

终止液有腐蚀性，操作时请小心，并确保有效防护以避免直接接触人体，并须注意避免腐蚀其它物品。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。