碧云天的细胞示踪绿色荧光染色试剂盒(Cell-Tracker™ Green CMFDA)，即Cell Tracking Green Fluorescence Staining Kit with Cell-Tracker™ Green CMFDA，是一种以Cell-Tracker™ Green CMFDA (也称CellTracker Green CMFDA或Green CMFDA)为绿色荧光探针用于活细胞荧光示踪的试剂盒。本试剂盒可使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪等荧光检测系统进行检测。本试剂盒兼容后续的细胞固定和通透，但染色后再固定和通透，荧光强度会有一定程度的下降。本试剂盒不能用于死细胞或固定后细胞的染色。

Cell-Tracker™ Green CMFDA，全称为5-氯甲基荧光素二乙酸酯(5-Chloromethylfuorescein Diacetate)，是二乙酸荧光素(Fluorescein diacetate, FDA)的氯甲基衍生物，分子式为C25H17ClO7，分子量为464.85，CAS number为136832-63-8。作为一种细胞膜通透性荧光探针，Cell-Tracker™ Green CMFDA能穿透细胞膜进入活细胞，进入胞浆后转化为不可透过细胞的反应产物5-氯甲基荧光素(5-Chloromethylfluorescein, CMF)。本产品具有以下特性：激发后发出明亮的绿色荧光，最大激发波长约为492nm，最大发射波长约为516nm；可通过氯甲基与细胞内的谷胱甘肽(GSH)在谷胱甘肽巯基转移酶(GST)作用下生成不可逆的荧光产物，能完好地保留在胞内，实现长期标记[1]；荧光信号在生理pH值下非常稳定，至少可维持72小时，非常适用于细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭等示踪研究[2]；在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞；无毒，不影响细胞活力或增殖。

本试剂盒对HeLa细胞的荧光显微镜和流式细胞仪检测效果请参考图1。

图1.碧云天细胞示踪绿色荧光染色试剂盒(Cell-Tracker™ Green CMFDA) (C2233)染色HeLa细胞(人宫颈癌细胞)的染色效果图。在本试剂盒标记HeLa细胞后的第0-5天分别在荧光显微镜下观察细胞染色情况(图A)并传代，同时使用流式细胞仪检测(图B)。检测结果显示，Cell-Tracker™ Green CMFDA (简称CMFDA)标记的HeLa细胞呈现非常明亮的绿色荧光，随着传代次数的增加荧光强度逐渐减弱，不同分裂次数的细胞峰区分明显。图B中流式细胞仪检测通道为FITC (Ex/Em=488/525)。本实验所用染色工作液中Cell-Tracker™ Green CMFDA的浓度为5X。实际检测效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，本图仅供参考。

对于96孔板中的样品，按照每孔使用100μl染色液计算，本试剂盒的小包装和中包装可以进行500次和2000次检测；如果用于流式细胞仪检测，按照每个样品的检测体系体积为0.5ml时，本试剂盒的小包装和中包装可以进行100次和400次检测；对于6孔板中的贴壁培养细胞样品，按照每孔使用1ml染色液计算，本试剂盒的小包装和中包装可以进行50次和200次检测。

-20ºC保存，一年有效。其中Cell-Tracker™ Green CMFDA (1000X)须避光保存。

Cell-Tracker™ Green CMFDA (1000X)反复冻融对于其检测效果有影响，首次使用时请适当分装，避免反复冻融。

对于微量的液体，每次使用前请先离心数秒钟，使液体充分沉降到管底。

荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。