识别位点

在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 50%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、省时酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液 + SAM，37℃。
热失活：65℃ 20 分钟。

浓度

2,000 units/ml。

甲基化敏感性

对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。

注意事项

过量 Mmel 会阻断切割，最适用量应为化学当量或接近化学当量。37℃ 温育时，15 分钟可彻底切割。冰浴或 50℃ 温育时有明显切割作用。
当识别序列有两个拷贝时，MmeI 更易切割，带有单个酶切位点的质粒，酶切受限。
高离子强度（＞ 200 mM）抑制 Mmel 的酶活性。
该酶要获得最佳活性需加入 SAM（随酶提供）。
高效的切割反应需要加入钾离子。