识别位点

在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 10%
NEBuffer 2.1: 10%
NEBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液 + SAM，37℃。
热失活：65℃ 20 分钟。

浓度

2,000 units/ml。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

NmeAlll 需 2 个拷贝的识别序列才能进行切割。因此，只有单一识别位点的 pUC19 不能被切割。NmeAlll 10 倍过量酶切时，仅有不到 50%的 DNA 会被切割。建议消化每 μg DNA，酶量不大于 5 个单位，反应时间不超过 1 小时。
冰浴或 25℃ 温育时，也能有效切割。
即使延时酶切，NmeAlll 也是进行部分酶切形成一种稳定模式。1 单位即被定义为产生这种稳定酶
切产物所需的酶量。
该酶要获得最佳活性需加入 SAM（随酶提供）。
注意：切割位点根据识别位点与剪切位点间 DNA 的序列会发生 1 个碱基对的偏移。在给定序列中，通常只有 1 个识别位点会在反应中占主导。详情请登陆：www.neb-china.com ，www.neb.com。