概述

预混上样染料溶液用于琼脂糖和非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳，可进行不同的示踪染色。溶液中含有 SDS，可使条带清晰，避免有些内切酶切割后结合在 DNA 上引起的条带拖尾。由于高浓度的 SDS 能干扰 SYBR 和 GelRed 核酸荧光染料显色。因此使用这两种核酸染料时,建议使用无 SDS 的紫色凝胶上样染料（NEB#B7025）。凝胶上样染料中的 EDTA，可螯合反应缓冲液中10 mM 的 Mg2+，从而使反应终止。溴酚蓝是电泳的标准示踪染料。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中，它的迁移率大约与 300 bp 的片段相同。橙黄
G 不会显示在凝胶电泳照片中，除了一些最小的片段，橙黄 G 跑在凝胶的最前面。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中，它的迁移率大约与 50 bp 的片段相同。NEB 也提供与溴酚蓝迁移率相似的紫色染料。该染料在紫外灯下无阴影。

凝胶上样染料组成成分：

蓝色凝胶上样染料 1X：

2.5% Ficoll-400，11 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH8.0），0.017% SDS 和 0.015% 溴酚蓝。

橙色凝胶上样染料 1X：

2.5% Ficoll-400，11 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH8.0），0.017% SDS 和 0.15% 橙黄 G。

紫色凝胶上样染料 1X：

2.5% Ficoll-400，10 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0@ 25℃)0.08% SDS, 0.02% 染料1和 0.0008% 染料2。

紫色凝胶上样染料 1X，无 SDS：

2.5% Ficoll-400，10 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0@ 25℃），0.02% 染料 1 和 0.0008% 染料 2

注意：25 μl 反应体系中添加 5 μl 凝胶上样染料；50μl 反应体系中加 10 μl 凝胶上样染料。上样前混匀。室温保存。

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