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Taq DNA 连接酶
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  • 货号 M0208V
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 耐热性好
 dsDNA 切刻修复
 用于 Gibson 组装方法 
 可用连接酶链式反应和连接酶检测反应对等位基因进行特异性检测

概述

相邻 DNA 链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对,并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。Taq DNA 连接酶以 NAD 为辅因子。在 37-75℃ 范围内,Taq DNA 连接酶均有活性。

来源

纯化自重组 E. coli 菌株,含有自 Thermus aquaticus HB8 中克隆的连接酶基因。 

反应条件

1X Taq DNA 连接酶反应缓冲液
[20 mM Tris-HCl(pH 7.6 @ 25℃),25 mM KAc,10 mM Mg(Ac)2,10 mM DTT,1 mM NAD 和 0.1% Triton X-100],45℃ 温育。 

该酶需 NAD+ 作辅因子,在 10X Taq DNA 连接酶缓冲液中已添加 NAD+为了延长 NAD的半衰期,缓冲液应于 -70℃ 贮存。

质保声明

Taq DNA 连接酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义(粘性末端活性单位)

1 单位指 50 μl 反应体系中,45℃ 条件下,15 分钟内能使 50% 的 1 μg 经 BstEII 消化的 λDNA 片段(12 bp 粘性末端)发生连接所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

40,000 units/ml。 

注意事项

Taq DNA 连接酶可以有效连接 12 bp 的互补片段,但却无法连接 4 bp 的互补片段(典型限制酶消化产物)。

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 
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