特性

 DNA 和 RNA 的去磷酸化

 克隆载体去磷酸化，防止载体自连

 测序或 SNP 分析前除去 PCR 反应中dNTP 和焦磷酸盐

 T4 PNK 标记 5´ DNA 末端前的去磷酸化

概述

热敏磷酸酶催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外，热敏磷酸酶水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。热敏磷酸酶在分子生物学研究中应用广泛，如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团，用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中，对线性载体去磷酸化，防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。热敏磷酸酶也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP，用于制备测序模板和 SNP 分析。热敏磷酸酶在 70℃ 温育 5 分钟即可完全的、不可逆的失活，因此，在连接或末端标记之前，可以不用去除热敏磷酸酶。

来源

克隆有 TAB5 AP 基因的 E. coli 菌株，该基因最初克隆于质粒 pNI 中，后来重新克隆于质粒 pEGTAB7-4.1 中。

反应条件

1X 热敏磷酸酶反应缓冲液

[50 mM Bis Tris-丙烷 HCl，1 mM MgCl₂，0.1 mM ZnCl₂（pH 6.0 @ 25℃）]，37℃ 温育。
热失活：80℃ 加热 2 分钟。

质保声明

热敏磷酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

单位定义

1 μg 经内切酶消化产生 5´ 凹陷末端的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制＞ 95% 的 DNA 再环化（通过转化 E. coli 细胞来检测）。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

浓度

5,000 units/ml。

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。