特性

 高效将 ATP 转化为 AMP

 在 DNA 测序循环中去除脱氧核糖核苷酸

 将 5´ 端三磷酸化的 RNA 转化为可连接的单磷酸化 RNA

 将 5´ 端三磷酸化的 RNA 转化为单磷酸 RNA，后者可被 5´ 核酸外切酶 XRN-1（NEB #M0338）切割
 提供 10 倍高浓度产品

概述

ATP 双磷酸酶（重组酶，E. coli）是一种高效 ATP 双磷酸酶。该酶可相继催化去除 ATP 的磷酸基团生成ADP，然后 ADP 生成 AMP，释放无机磷酸盐。该酶为重组酶，是三磷酸腺苷双磷酸酶的一个亚型。它可以水解三磷酸和双磷酸核苷以及脱氧核糖核苷生成相应的单磷酸核糖核苷。三磷酸腺苷双磷酸酶可以相继去除 γ 和 β 磷酸基团，将 5´ 端三磷酸化的 RNA 转化为单磷酸化 RNA。

来源

纯化自大肠杆菌，其携带有编码马铃薯 ATP 双磷酸酶的基因（S. tuberosum apyrase）。

反应条件

1X Apyrase 反应缓冲液。

[20 mM MES, 50 mM NaCl, 5 mM CaCl2, 1 mM DTT,0.05% Tween 20,（pH 6.5 @ 25℃）]。

热失活：65℃ 温育 20 分钟。

质保声明

ATP 双磷酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中，1X Apyrase 反应缓冲液，30℃ 条件下，1 分钟内催化 1 μmol ATP（1 μM, NEB #P0756）释放 1 μmol 无机磷酸盐所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

浓度

500 units/ml。

注意事项

Apyrase 对 ATP 和 ADP 的催化活性比高达 14:1。

Apyrase 是一种钙激酶。在 Apyrase 反应缓冲液中，Mg²⁺ 代替 Ca²⁺，Apyrase 大约有 50% 的活性。

作为金属离子依赖性的酶，EGTA 和 EDTA 可以抑制 Apyrase 的活性。

在 NEBuffers 1.1、2.1、3.1 和 CutSmart Buffer 中大约有 30% 的活性。
Apyrase 不会去除真核 mRNA 5´ 端的帽结构。