特性

 不同起始量的 RNA 均能高效反转录

 提高热稳定性
 合成至少 10 kb 长度的 cDNA

概述

ProtoScript II 反转录酶是一种重组的 M-MuLV 反转录酶，其 RNase H 酶活性降低且热稳定性增加。与野生型 M-MuLV 反转录酶相比， ProtoScript II 可在更高的温度下合成第一链 cDNA。 ProtoScript II 活性温度高达 50℃，且具有特异性高、产量高和合成 cDNA更长的特点，合成 cDNA长度可达 12 kb。本产品曾用名为 M-MuLV 反转录酶（RNase H^–）。

来源

来自重组 E. coli 菌株，携带有突变的 MMuLV 反转录酶（RNase H^-）编码基因，经高度纯化而获得。

反应条件

1X ProtoScript II 反转录酶反应缓冲液

[50 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25℃)，75 mM KCl，3 mM MgCl₂]，10 mM DTT，200 units ProtoScript II ，0.5 mM dNTPs（不随酶提供）和 5 μM dT₂₃VN（不随酶提供），42℃ 温育 50 分钟。如果使用随机引物建议在室温放置 10 分钟后再进行 42℃ 反应。
热失活：65℃ 20 分钟。

质保声明

通过 RT-PCR 验证，以总 RNA 为模板可合成 9.2 kb 的 cDNA。

单位定义

1 单位指在 50 μl 反应体系中，以 poly(rA) 为模板，以 oligo(dT)₁₈ 为引物，37℃ 条件下，10 分钟内催化 1 nmol 的 dTTP 掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或www.neb.com。

浓度

200,000 units/ml。

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反应条件

质保声明

单位定义

浓度