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Stbl2 Chemically Competent Cell
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  • 货号 G6004-10
  • 品牌 昂羽 ( 一级代理 )
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  • 规格/包装 10×100ul
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商家描述 商家资质信息 产品评价(0)
AngYu Biotechnologies 创中国品牌 出世界精品
Shanghai China 上海 021-3368 6867 Http://www.angyubio.com
AngYuBio
Stbl2 感受态细胞
Stbl2 Chemically Competent Cell
产品编码:G6004
保存条件: -80℃
产品规格:
货号、数量、规格:
G6004-10(10支100ul)、G6004-50(50支100ul)
基 因 型
F- mcrAΔ(mcrBC-hsdRMS-mrr) recA1 endA1 lon gyrA96 thi
supE44 relA1 λ-Δ(lac-proAB)
简 要 说 明
Stbl2菌株来源于JM109 E.coli strain,适合克隆不稳定插入
片段(正向重复序列,逆转录病毒序列等);mcrA突变和
mcrBC-hsdRMS-mrr deletion使该菌株更适于克隆甲基化的基因
组序列;同时Stbl2也可用于慢病毒载体的构建。recA1和endA1
的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。不存在
lacIqZΔM15,不可用于蓝、白斑筛选。
AngYuBio High5TM系列Stbl2感受态细胞经特殊工艺制作,经
pUC19检测转化效率可达109cfu/μg DNA。
说明书校正人:LXC(修改参数、内容,技术老师可直接修改)一旦有更改:PDF、网站上的说明书,必须同步更改
《我们可以为您提供 粉色标注 的 2种包装》操 作 说 明
1.AngYuBio Stbl2感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温
片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的
DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置
25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低
转化效率。
3.向离心管中加入0.9 mL 室温 S.O.C. 培养基或LB培养基(推荐
使用S.O.C培养基,提高转化效率)。
4.30℃,225 rpm复苏90分钟。(当质粒中含有不稳定片段时,
30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control PUC19计算转
化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟。)
5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重
悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C.或LB培养基上。
6.将平板倒置放于30℃培养箱过夜培养。(若转化control
PUC19 计算转化效率,则需37℃培养过夜)。
注 意 事 项
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于
涂板的菌量。
4.S.O.C.或LB培养基均可使用,S.O.C.可提高转化效率20%;实
验人员可选择在37℃或30℃培养细胞,37℃条件下,菌生长速
度加快,有利于提高质粒产量,30℃培养可降低错误重组概率。
附:S.O.C. Medium配方
2% Tryptone0.5% Yeast Extract
10 mM NaCl
2.5 mM KCl
10 mM MgCl2
10 mM MgSO4
20 mM glucose
NaOH调pH值至7.0
AngYu Biotechnologies 科 技 引 领 未 来
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昂羽生物工程2021-1108修订版本
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