RIPA 裂解液（强）

保存条件

本产品于2-8℃保存，有效期1年。

产品概述

RIPA 裂解液（强）是一种高效的组织细胞裂解液。主要用于动物组织和动物细胞中可溶蛋白的提取。得到的蛋白样品可以用于常规的 Western Blot、IP 等。

自备材料

PMSF或者蛋白酶抑制剂

注意事项

请务必在使用本试剂之前阅读此注意事项

◇ 本产品含有去污剂，不适于用 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒来测定蛋白浓度，可选择 BCA 法测定蛋白浓度。

◇ 操作时请穿实验服并戴一次性手套操作。

◇ 裂解样品需在冰上操作。

◇ 需自备 PMSF或者蛋白酶抑制剂。

使用方案

本产品若有沉淀析出，请将其室温放置半小时或常温水浴，待沉淀溶解后使用。

RIPA需要现用现配。

1. 前处理

1） 贴壁细胞：去掉培养液，用PBS、无血清的培养液或者生理盐水将细胞洗一遍，弃上清。加入裂解液，用枪反复吹打，使裂解液和细胞充分接触。按照6孔板每孔加入裂解液的量为150-250 μL。

2） 悬浮细胞：离心收集细胞，去掉培养液，加入裂解液，轻弹，使裂解液和细胞充分接触。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。按照5-10×10 ⁵ 个细胞加入裂解液量为150-250 μL。

3） 组织样品：先把组织剪碎，加入裂解液，用玻璃匀浆器匀浆，使裂解液和细胞充分接触，直至充分裂解。按照20 mg组织加入裂解液量为150-250 μL（可根据所需蛋白样本的浓度调整裂解液的用量）。

2. 后处理

将裂解后的悬液按照10000-14000×g转速离心3-5 min，保留上清，可根据需要继续进行蛋白浓度测定、SDS-PAGE、WesternBlot和IP等操作。