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一般描述
KAPA2G Fast HotStart®小鼠基因分型试剂盒包含KAPA Express Extract(一种新型热稳定蛋白酶)、缓冲系统(能够在短短15分钟内从小鼠组织中提取出颗粒剂用于PCR的DNA)以及含染料的KAPA2G快速基因分型混合物,其中,混合物含有的DNA聚合酶通过定向进化技术改造而具有高持续性和超高速。KAPA Express Extract和KAPA2G快速基因分型混合物的组合可在低至1小时内从小鼠组织中可靠地提取和扩增DNA片段,而传统方案则需要超过1天的时间。KAPA2G Fast基因分型混合物(2X)是一种即用型预混合液,其中包含用于快速PCR的所有组分和稳定剂,以及除引物和模板外的两种惰性染料。
应用
生化/生理作用
KAPA2G Fast基因分型混合物产生的DNA片段进行3′-dA-tailed处理,并可克隆进TA克隆载体,或用于常规下游分析或应用,包括限制酶消化、克隆和测序。和野生型Taq一样,KAPA2G Fast 具有 5'→3'聚合酶和 5'→3'核酸外切酶活性,但是没有3'→5'核酸外切酶(校正)活性。KAPA2G Fast的精确性与野生型Taq相近;错配率约为每结合1.7 x 105个核甘酸错配1次。和依赖蛋白酶K消化的现有方案不同,采用KAPA Express Extract试剂盒可以在单个试管中方便地进行萃取,无需使用危险的化学物质或多个洗涤步骤。
特点和优势
提高生产能力、周转时间时间和可靠性:
优于粗提取方法和商业试剂盒:
- PCR-ready DNA 只需 15 分钟即可生成
- 最低限度的处理,从而降低样本丢失或污染的风险
- 有充足模板用于多种测定;易于缩放,以处理 96 孔格式的样本
- 快速可靠地扩增各种扩增子长度和GC含量各异的DNA片段
优于粗提取方法和商业试剂盒:
- 周转时间增加
- 特异性增强
- 成本降低