性能
QIAGEN Plasmid Kit利用重力流QIAGEN阴离子交换柱技术高效纯化质粒DNA。产量可达10 mg(Giga)、2.5 mg (Mega)、500 µg (Maxi)、或100 µg(Midi)高拷贝质粒DNA(培养体积取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌株和培养基。)QIAGEN Plasmid Kits纯化的质粒DNA适合多种应用,如:转染、克隆和体外转录。
原理
QIAGEN-tips内独特的阴离子交换树脂专为纯化核酸设计。它独特的分离特性,使纯化的DNA的纯度相当于连续2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度。预装的QIAGEN-tips利用重力流原理工作,缩短了纯化质粒的手动操作时间。整套QIAGEN质粒纯化体系避免苯酚、氯仿、溴化乙锭和CsCl等有毒物质,减小对使用者和环境的危害。
操作流程
使用QIAGEN Plasmid Kits,细菌裂解物通过离心澄清。澄清后的裂解物上样到阴离子交换柱,质粒DNA在适当的低盐条件和pH条件下与树脂进行选择性结合。RNA、蛋白质、代谢产物和和其它低分子量杂质用中盐洗涤液去除,用高盐缓冲液洗脱纯质粒DNA。得到的DNA用异丙醇沉淀浓缩和脱盐后,离心收集。
应用
QIAGEN Plasmid Kits纯化质粒DNA适合多种应用,如:
1、转染
2、克隆
3、PCR
4、体外转录
技术参数
应用:Transfection,cloning,sequencing,capillary sequencing etc
起始样本体积:2.5–5 liters culture volume
质粒类型:High-copy,low-copy,cosmid DNA
处理:Manual(centrifugation)
每次处理样本量,通量: 1 sample per run
技术:Anion-exchange technology
每次运行时间或处理样本数:320 min
产量:<10 mg