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■ 制品内容 (Code No.: RR086A: 50 μl反应×100次)
2X One Step TB Green RT-PCR Buffer 4*1 840 μl × 3 支
PrimeScript 1 Step Enzyme Mix 2*2 200 μl
RNase Free dH2O 1.25 m l × 2 支
ROX Reference Dye (50X)*3 100 μl
ROX Reference Dye II (50X)*3 100 μl
*1 内含dNTP Mixture,Mg2+,TB Green等。
*2 内含PrimeScript RTase,RNase Inhibitor和TaKaRa Ex Taq HS。
*3 用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。
◆ 使用ROX Reference Dye
· Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
· StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 使用ROX Reference Dye II
· Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 不必使用的扩增仪
· Thermal Cycler Dice Real Time System series (Code No. TP950/TP970/TP980/TP990, TP900/TP960/TP700/TP760:终卖)
· LightCycler (Roche Diagnostics)
■ 制品说明
本制品是采用TB Green嵌合荧光法进行One Step RT-PCR反应的专用试剂。使用本制品进行Real Time RT-PCR反应可在同一反应管内连续进行,操作简单,并能有效防止污染。本反应体系由于可以对扩增产物进行实时检测,大大提高了检测灵敏度,并省略了PCR反应后的电泳步骤,非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。
制品中使用了适合于Real Time RT-PCR的反转录酶PrimeScript RTase和高效的PCR热启动酶TaKaRa Ex Taq® HS,具有高扩增效率和高扩增特异性,能进行稳定的Real Time One Step RT-PCR反应。本制品的Buffer经过改良,使反应的特异性比使用One Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit(Perfect Real Time)(Code No. RR066A)更高。另外,反应使用的所有酶都配制成了Enzyme Mix的形式,使操作更加方便简单。