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TG1感受态细胞
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  • 货号 BC120-02
  • 品牌 biomed/博迈德 ( 一级代理 )
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  • 规格/包装 100ul×20
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TG1菌株来源于大肠杆菌K-12,主要用于噬菌体展示(Phage Display),也可进行M13噬菌体相关的实验,也可用于普通质粒的克隆构建及提取。lacZΔM15的存在可进行α互补原理上的蓝白斑筛选实验。由于该菌株不含核酸酶endA1突变,提取的质粒中核酸酶含量较高,需用去蛋白液处理。TG1感受态细胞由特殊工艺制成,经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg DNA
1.将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后,加入1-5μl含有1-100ng的质粒DNA到细胞中,用手指拨打管底,轻轻混匀。


 2.冰水浴中放置30分钟,不要晃动。


 3.42℃热击60秒钟,不要晃动。


 4.冰水浴中放置2分钟,不要晃动。


 5.加入500μl的室温的SOC或LB培养基。


 6.置于37℃摇床中,150-200rpm,复苏培养60分钟。


 7.取50-100μl菌液涂布在含有氨苄青霉素抗性的LB平板上。待液体吸干后,倒置平板37℃培养12-24小时。


(平板划线分离法:复苏培养结束后,12000rpm离心30秒钟,弃掉上清,留100μl左右的液体,用200μl吸头轻轻吹打散菌块,取10μl重悬的菌液分多点滴在平板上,倾斜吸头,用吸头头部的侧面将滴在平板上的液体来回划线。这个方法可以获得更大的单克隆菌落。)

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