多聚甲醛溶液(4% PFA)

【保存条件】

2-8℃，避光，12个月有效。

【产品概述】

多聚甲醛溶液(4% PFA)是一种广泛用于免疫组化、免疫细胞化学等检测时组织、组织切片、细胞等生物样品固定的溶液，它能较好的保护组织和细胞的形态结构以及核酸。

本产品配制在PBS溶液中，无需稀释即可直接用于组织或细胞的固定。若需使用低浓度多聚甲醛，可按比例用PBS稀释。

【使用方法】

1、细胞样品：去除培养液后，按照每六孔板一个孔加入1毫升固定液的比例，加入4%多聚甲醛固定液。对于细胞涂片等其它细胞样品，加入固定液的量以充分盖住样品为准。通常室温固定10-20分钟即可。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。

2、组织切片：加入4%多聚甲醛固定液量以充分覆盖切片为准，或使用染色架进行固定。通常室温固定10-20分钟即可，若切片较厚时可以适当延长固定时间。用缓冲液洗涤后即可用于染色。

3、组织块样品：在4%多聚甲醛固定液中室温或4ºC浸泡2至24小时。建议不超过8小时，除非组织块特别大，难以渗透。固定完成后，放入装有蒸馏水的离心管中清洗，每15-30分钟换一次水，共6-8次，建议在摇床进行，或用流水冲洗1-2小时。随后进行脱水，包埋。

【注意事项】

1、本产品开启后放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸，使溶液pH降低，从而影响固定效果。

2、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。

3、多聚甲醛虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。

4、多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中，固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留，因此后续实验结果如果受醛基影响，须尽量洗去残留的多聚甲醛。

5、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，可造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。

6、本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。