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Empagliflozin (SGLT抑制剂)
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  • 货号 SD2411
  • 品牌 Beyotime/碧云天 ( 经销商 )
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  • 规格/包装 10mM×0.2ml
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使用稳定表达hSGLT-1、-2、-4、-5或-6、或rSGLT-1或-2的细胞系进行钠依赖性的单糖运输抑制实验。细胞在200μl摄取Buffer(10mM HEPES，137mM NaCl，5.4mM KCl，2.8mM CaCl2，1.2mM MgCl2，50μg/ml Gentamycin，0.1% BSA)中37℃下预温育25分钟。加入10μM Cytochalasin B和不同浓度的实验化合物，15分钟后，开始摄取实验。加入0.6μCi [14C]标记的单糖，即[14C]标记的AMG、葡萄糖、果糖、甘露糖或肌醇，在0.1mM AMG(或相应的非放射性的单糖)开始摄取反应。在37℃下，温育60分钟 (hSGLT-5)，90分钟(hSGLT-4)或4小时(hSGLT-2)后，使用300μl PBS洗涤细胞三次，然后间歇震荡5分钟溶解在0.1N NaOH中。裂解液与200μl MicroScint 40混合，震荡15分钟，使用TopCount NXT计数放射性。SGLT-4和SGLT-5实验细胞在预处理Buffer(摄取 Buffer使用氯化胆碱代替NaCl)中预温育25分钟，然后加入摄取Buffer。

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