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RT Master Mix for qPCR (gDNA digester plus)
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  • 货号 HY-K0511
  • 品牌 MedChemExpress (MCE) ( 经销商 )
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  • 规格/包装 100 rxns
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述及优势

MCE 反转录试剂盒 (预混 gDNA 消化酶)是一款高效、快速的反转录试剂。本产品含有 gDNA digester 和 2× Super RT Mix。gDNA digester 可去除 RNA 模板中残留的基因组 DNA (gDNA) 污染,保证后续结果更加可靠。 MCE反转录试剂盒 (预混 gDNA 消化酶)经过反复优化,具有稳定性高、重复性好的特点,同时灵敏度高,与模板的亲和力强,适用于少量模板以及低拷贝基因的反转录反应。反转录产物 cDNA 可直接用于 PCR 或qPCR,与 MCE SYBR Green qPCR Master Mix (HY-K0501)配合使用即可进行高性能的基因表达分析。

 

特点:

•   2 分钟内超快去除 gDNA

•   优化的缓冲液提高了 cDNA 合成的灵敏度和可靠性

•   模板量少也能进行超高效反应

•   提供 Oligo dT 引物和随机引物

储存条件 & 期限

-20°C,2 年

避免反复冻融

操作流程

1. 在冰上解冻 RNA 模板、gDNA digester、5× gDNA 消化液缓冲液、和 5× Super RT Mix,混合均匀。

2. 在 RNase-free PCR 管中,按下列组分配制反应液,反应液配制操作请在冰上进行。用移液器轻轻吹打混匀。42ºC 孵育 2 min。

Components Quantity
5× gDNA digester Buffer 2 μL
gDNA digester 1 μL
Total RNA / mRNA 5 ng-5 μg / 5 ng-500 ng
RNase-Free H2O To 10 μL

3. 在步骤 2 的混合物 (10 μL) 中加入 10 μL 2× Super RT Mix。 充分混合后短暂离心收集。 在 PCR 仪器或水浴中按以下步骤孵育混合物

Temperature Time
25°C 5 min
42°C 30-60 min
85°C 2 min

Note:

a. 反转录温度:推荐使用 42ºC。对于高 GC 含量模板或者结构复杂模板,可将反转录温度提高到 50ºC。

b. 85ºC 下加热 2 分钟停止反应,然后在冰上冷却。

4. 合成的 cDNA 可立即用于后续 PCR 或 qPCR 反应,也可 -20ºC 短期保存,若需长期保存,建议分装后,于 -80ºC 保存,避免反复冻融。

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