ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix

通用型高灵敏度染料法定量PCR 检测试剂盒

基因表达差异分析；绝对定量分析

·  广泛的平台适用性：特殊的ROX参比染料，适用于所有qPCR仪，无需在不同的仪器上调整ROX浓度。

· 较高的扩增特异性：使用新型抗体法热启动酶Champagne Taq DNA Polymerase，配以优化的Buffer和特异性促进因子Exactor，有效避免引物二聚体和非特异性扩增的产生。

· 优异的扩增灵敏度：预混液在宽广的模板区间具有优异的线性关系，同时可检测出具有个位数拷贝的待测模板。

· 程序兼容性：预混液可用标准程序和快速程序定量，解决程序的兼容性。

1. 全平台通用

图1

使用 ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix（Vazyme #Q711）在不同类型的 qPCR 仪（机型：StepOnePlus、QuantStudio 3、CFX Connect ）上扩增GAPDH 基因，定量结果优异。说明Vazyme #Q711 预混液仪器适用性广，无需针对不同仪器调整 ROX 浓度。

2. 灵敏度与特异性的平衡

图2

图 A 是将 pEMT 质粒进行 8 个 10 倍梯度稀释，图 B 是根据图 A 的 CT 值得出的标准曲线。第 8 个梯度中质粒拷贝数浓度约为 6 copies/ 4 μl，使用 ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix（Vazyme #Q711）预混液对各稀释梯度中的 pEMT 质粒进行检测，每孔模板使用量为 4 μl。结果显示，Q711 预混液在宽广的模板量区间内具有优异的线性关系，可以检测出个位数拷贝的待测模板，灵敏度高。

图 C 是以 HeLa 细胞 cDNA 为模板，使用 Vazyme #Q711 和 Q311 预混液及竞品染料法 qPCR 试剂（分别来自 Supplier A、B、C），在相同条件下测试 25 个随机挑选的基因，用以检测扩增特异性。统计结果显示：Q711 预混液能够完成超过 96%（24/25）的目标基因检测，特异性高。

3. 稳健的重复性

图3

以 HeLa 细胞 cDNA 为模板，使用 Vazyme #Q711 预混液检测 TBP 基因的表达，设置 48孔重复，用以检测扩增的稳定性。可以看到，Q711 预混液的扩增重复性好。

4. 兼容标准程序与快速程序

图4

使用 Vazyme #Q711 预混液检测 HeLa 细胞 cDNA 样本（进行 4个10倍梯度的稀释）中TPB基因 (扩增子长度：227 bp）的表达，分别选择标准程序和快速程序上机（机型：StepOnePlus）。 结果显示，Q711预混液能够兼容标准与快速程序的定量检测。

本产品是使用SYBR Green I嵌合荧光法进行qPCR反应的专用预混液，其中Champagne Taq DNA Polymerase为一种新型的抗体法热启动DNA聚合酶，具有特异性强、检测灵敏度高等诸多优点，配以针对qPCR优化的合适Buffer以及特异性促进因子Exactor，适合于进行高特异性、高灵敏度的qPCR反应。本产品中含有特殊的ROX Passive Reference Dye，适应于所有qPCR仪器，无需在不同的仪器上调整ROX的浓度，只需在配制反应体系时加入引物和模板即可进行扩增。