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产品描述
吉凯基因AAV Helper-Free System包装系统由病毒载体、pAAV-RC载体、pHelper载体共三个质粒组成。病毒载体包含真核启动子和当外源序列克隆入多克隆位点（MCS）时哺乳动物细胞高水平基因表达所需的其它元件，载体同时也包含指导病毒复制和包装的 AAV 反向末端重复序列（ITRs）。通常根据不同的实验目的（如启动子活性研究、基因表达研究、RNA干扰等）应选择合适的病毒载体。pAAV-RC 载体包含AAV编码复制蛋白和病毒衣壳蛋白的rep和cap基因，稳固rep和cap基因的表达水平是获得期望的高滴度病毒产品的关键步骤。pHelper质粒包含AAV-293细胞生产高滴度病毒必须的腺病毒基因VA，E2A和E4的集合。腺相关病毒（AAV）是一种复制缺陷型细小病毒，其增殖复制需要腺病毒或疱疹病毒的辅助。AAV无辅助病毒系统（AAV Helper-Free System）可以在无辅助病毒的条件下生产出重组腺相关病毒。这种系统利用已知明确与调节AAV复制和表达的腺病毒基因产物，并且将这些基因产物通过转染引入宿主绅胞。
吉凯的AAV Helper-Free System 中，包含 AAV 末端重复序列的载体质粒与包含 rep/cap 基因的辅助质粒没有任何共同区域，从而能够阻止通过重组来形成野生型AAV，也就是辅助质粒和载体质粒不会发生重组而恢复出野生型病毒。
产品优势-宿主细胞范围广
腺相关病毒可以感染广泛的哺乳动物细胞并且已成功应用于人源和非人源蛋白的表达，宿主细胞活跃的分裂不是感染的必要条件，重组腺相关病毒能感染分裂期和非分裂期细胞。和其它病毒来源各种载体相比，已证明用于具有免疫活性细胞的基因表达时，腺相关病毒载体效果更好；产品优势-长期的基因表达能力
重组AAV能保存于人类宿主绅胞中，保持长期的基因转录表达能力，对于终末分化的细胞这个优点特别明显。这是因为绝大多数重组 AAV 不会整合到基因组上，而是串联形成附加体（episome）存在于细胞核中。分裂的细胞在细胞复制和分裂后会丢失附加体，并因此失去基因表达能力。病毒能整合宿主基因组，导致基因在分裂期细胞内长期表达，但是这是稀有事件。如果使用极高感染复数（MOI）的 AAV 进行感染或细胞感染过野生型腺病毒并表达腺病毒复制酶，则整合发生的可能性会增加。然而，使用野生型腺病毒来增加整合事件会降低 AAV 系统的生物安全性；低免疫原性
与已获得临床应用的腺病毒载体相比，AAV 在注射后引起的免疫反应是微弱并且短暂的。大剂量全身性特别是尾静脉使用虽然也会导致抗体的产生，但很少有感染上的细胞之后被细胞免疫系统所清除，这被认为与AAV对抗体呈递细胞感染(APC)较弱相关。当 AAV 用于局部感染肌肉、脑、眼等组织时，重复感染效率基本上不会受到太大的影响，这种特性对于动物实验上的使用显然极有帮助；产品优势-良好的扩散性能
AAV的病毒粒径只有腺病毒的1/5，慢病毒的1/4，体积上相差数十倍到100倍，所以AAV的扩散性远高于这两种病毒。实践证明，AAV9型可以透过血脑屏障感染神经元和胶质细胞，这为无创基因转导和治疗神经系统性疾病提供有力工具。另外病毒原液经浓缩后滴度可达>=1E+12 V.G./mL。结合这两种性质，无论是在局部还是整体AAV都能形成大面积的感染；产品优势-较高的生物安全级别
AAV是天然缺陷型病毒(生产性感染依赖亍几个额外的反式因子)，并且目前还没有发现它和任何的人类疾病有关联。在AAV Helper-Free System中，AAV反向重复(ITR)序列和rep/cap基因分别位于缺少共同序列的单独的质粒上，以阻止生产出重组野生型病毒。这样的特征赋予了作为病毒来源的基因传递和表达系统的AAV Helper-Free System一个较高的生物安全级别；不同血清型的AAV组织趋向性