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商家描述
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用途
该试剂盒用于体外定量检测Mouse 血清，血浆或其他生物体液中TNF-α浓度
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠TNF-α抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的小鼠TNF-α会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠TNF-α抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠TNF-α抗体与结合在包被抗体上的小鼠TNF-α结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，TNF-α浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中TNF-α的浓度。
| 反应类型 | 夹心法 |
| 规格 | 96T |
| 反应时间 | 3.5h |
| 反应性 | Mouse |
| 检测方法 | Colormetric |
| 检测范围 | 7.81—500 pg/mL |
| 灵敏度 | 4.69 pg/mL |
| 样本体积 | 100μL |
| 样本类型 | 血清，血浆或其他生物体液 |
特异性
可检测样本中的小鼠TNF-α，且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
典型数据
由于实验操作条件的不同（如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等），标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
|
Mean (pg/mL) |
23.99 | 59.60 | 188.68 | 25.90 | 59.84 | 172.83 |
|
Standard deviation |
1.42 | 3.47 | 6.40 | 1.68 | 2.46 | 7.50 |
| C V (%) | 5.93 | 5.82 | 3.39 | 6.50 | 4.11 | 4.34 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 95-112 | 102 |
| EDTA plasma (n=8) | 94-112 | 102 |
| Cell culture media (n=8) | 93-107 | 100 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 92-105 | 89-103 | 92-106 |
| Average (%) | 98 | 95 | 99 | |
| 1:4 | Range (%) | 93-110 | 90-105 | 90-102 |
| Average (%) | 100 | 96 | 96 | |
| 1:8 | Range (%) | 91-105 | 89-105 | 92-109 |
| Average (%) | 97 | 97 | 100 | |
| 1:16 | Range (%) | 86-101 | 87-99 | 91-104 |
| Average (%) | 93 | 94 | 98 |