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Human EEF2KMT qPCR Primer Pair，即人EEF2KMT qPCR引物对，主要用于基于SYBR Green的qPCR、One-Step qRT-PCR或semi-quantitative PCR。本引物为预先设计、经过qPCR验证、预混的引物对。
qPCR (Quantitative PCR)即定量PCR，也称实时荧光定量PCR或实时定量PCR (Real-time quantitative PCR)、实时PCR (Real-time PCR)，是一种在DNA扩增反应过程中，以荧光定量测定每个聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。qPCR常用的两种方法是SYBR Green等荧光染料法和探针法。SYBR Green等荧光染料法是使用带有荧光的、非特异的DNA结合染料SYBR Green等以检测PCR过程中积累的PCR扩增产物；而探针法(Probe method)，也常被称为TaqMan探针法，不使用荧光染料，而采用荧光基团和淬灭基团(Quencher)标记的DNA探针靶向拟通过PCR检测的目标序列[1,2]。
对于SYBR Green等染料法，引物至关重要。本系列引物产品采用碧云天开发的引物设计算法，优化了序列并经过验证，特异性佳，扩增效率高，引物二聚体形成发生率低，qPCR数据可靠；本系列引物对一般都跨外显子(Span exon junctions)，避免了对基因组DNA (gDNA)的扩增[3,4]；本系列的引物产品非常丰富，几乎包含了所有人和小鼠的基因；引物的Tm值约60ºC，大多数扩增产物(Amplicon)的长度约90-160bp。同时碧云天还提供针对各个信号通路的引物组合(Primer Panel/Primer Array)。
本产品为预混冻干粉，每管含正向引物(Forward primer，也称上游引物)和反向引物(Reverse primer，也称下游引物)各1nmol，共2nmol，不含核酸酶(Nuclease-free)，只需加入400μl超纯水溶解成2.5μM each，即可使用。按20μl或25μl体系使用2μl引物，本产品每管可以用于200次qPCR实验。
| Gene Information | |
| Gene Name | eukaryotic elongation factor 2 lysine methyltransferase |
| Gene Symbol | EEF2KMT |
| Synonyms | EFM3; SB153; FAM86A; eEF2-KMT |
| Organism | Human |
| Gene ID | 196483 |
| UniProt ID | Q96G04 |
| Main Accession No. | NM_201400 |
| Other Accession No. | NM_001289029, NM_201400, NM_201598, NM_201400.1, NM_201400.2, NM_201400.3, NM_201598.1, NM_201598.2, NM_201598.3, NM_001289029.1, BC010084, BC010084.2, BF314717, BG024981, BG683728, BI491350, BM691620, BQ215173, BQ921410, NM_201400.4 |
| Map Location | 16p13.3 |
| Pathway | - |
| Gene Summary | Enables protein-lysine N-methyltransferase activity. Involved in peptidyl-lysine trimethylation. Located in cytoplasm. Part of protein-containing complex. [provided by Alliance of Genome Resources, Apr 2022] |
| Amplicon Information | |
| Amplicon Length (bp) | 147 |
| NCBI mRNA ID | NM_201400.4 |
| NCBI Protein ID | NP_958802.1 |
| Ensembl Transcript ID | ENST00000427587.9 |
| Ensembl Gene ID | ENSG00000118894.15 |
| Ensembl mRNA ID | EEF2KMT-201 |
-20℃保存。建议复溶后进行适当分装，避免反复冻融。
注意事项：PCR扩增产物的长度可能会因基因转录后存在多种剪接形式而有所差异。
虽然本系列引物产品的特异性非常好，但仍建议进行熔解曲线(Melt curve)分析以确定扩增反应的特异性。如果只有一个熔解曲线峰(对应的退火温度即双链DNA产物的Tm值)，说明只有一种单一产物；如果熔解曲线出现双峰、多峰或杂峰峰，可能是引物二聚体或非特异性扩增、存在基因组DNA污染、试剂及环境被污染等。建议设置不含模板的对照(No template control, NTC)，即反应体系中包含除模板以外的所有反应组分，根据样品孔和无模板对照孔熔解曲线的差异，可判断是否存在引物二聚体或其它的非特异性扩增。
若反应体系存在扩增产物污染，推荐使用防污染型qPCR Mix。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
