
Mouse Pi4k2b qPCR Primer Pair,即小鼠Pi4k2b qPCR引物对,主要用于基于SYBR Green的qPCR、One-Step qRT-PCR或semi-quantitative PCR。本引物为预先设计、经过qPCR验证、预混的引物对。
qPCR (Quantitative PCR)即定量PCR,也称实时荧光定量PCR或实时定量PCR (Real-time quantitative PCR)、实时PCR (Real-time PCR),是一种在DNA扩增反应过程中,以荧光定量测定每个聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。qPCR常用的两种方法是SYBR Green等荧光染料法和探针法。SYBR Green等荧光染料法是使用带有荧光的、非特异的DNA结合染料SYBR Green等以检测PCR过程中积累的PCR扩增产物;而探针法(Probe method),也常被称为TaqMan探针法,不使用荧光染料,而采用荧光基团和淬灭基团(Quencher)标记的DNA探针靶向拟通过PCR检测的目标序列[1,2]。
对于SYBR Green等染料法,引物至关重要。本系列引物产品采用碧云天开发的引物设计算法,优化了序列并经过验证,特异性佳,扩增效率高,引物二聚体形成发生率低,qPCR数据可靠;本系列引物对一般都跨外显子(Span exon junctions),避免了对基因组DNA (gDNA)的扩增[3,4];本系列的引物产品非常丰富,几乎包含了所有人和小鼠的基因;引物的Tm值约60ºC,大多数扩增产物(Amplicon)的长度约90-160bp。同时碧云天还提供针对各个信号通路的引物组合(Primer Panel/Primer Array)。
本产品为预混冻干粉,每管含正向引物(Forward primer,也称上游引物)和反向引物(Reverse primer,也称下游引物)各1nmol,共2nmol,不含核酸酶(Nuclease-free),只需加入400μl超纯水溶解成2.5μM each,即可使用。按20μl或25μl体系使用2μl引物,本产品每管可以用于200次qPCR实验。
Gene Information | |
Gene Name | phosphatidylinositol 4-kinase type 2 beta |
Gene Symbol | Pi4k2b |
Synonyms | 2610042N09Rik; 4933409G22Rik |
Organism | Mouse |
Gene ID | 67073 |
UniProt ID | Q8CBQ5 |
Main Accession No. | NM_025951 |
Other Accession No. | BC062144, NM_025951, NM_028744, NM_025951.1, NM_025951.2, NM_025951.3, NM_028744.1, NM_028744.2, NM_028744.3, BC010257, BY140598 |
Map Location | 5; 5 C1 |
Pathway | - |
Gene Summary | Predicted to enable 1-phosphatidylinositol 4-kinase activity. Predicted to be involved in Golgi organization; endosome organization; and phosphatidylinositol phosphate biosynthetic process. Predicted to act upstream of or within phosphorylation. Predicted to be located in cytoplasm and membrane. Predicted to be active in endosome; plasma membrane; and trans-Golgi network. Orthologous to human PI4K2B (phosphatidylinositol 4-kinase type 2 beta). [provided by Alliance of Genome Resources, Apr 2022] |
Amplicon Information | |
Amplicon Length (bp) | 110 |
NCBI mRNA ID | NM_025951.3 |
NCBI Protein ID | NP_080227.2 |
Ensembl Transcript ID | ENSMUST00000031081.11 |
Ensembl Gene ID | ENSMUSG00000029186.13 |
Ensembl mRNA ID | Pi4k2b-201 |
-20℃保存。建议复溶后进行适当分装,避免反复冻融。
注意事项:PCR扩增产物的长度可能会因基因转录后存在多种剪接形式而有所差异。
虽然本系列引物产品的特异性非常好,但仍建议进行熔解曲线(Melt curve)分析以确定扩增反应的特异性。如果只有一个熔解曲线峰(对应的退火温度即双链DNA产物的Tm值),说明只有一种单一产物;如果熔解曲线出现双峰、多峰或杂峰峰,可能是引物二聚体或非特异性扩增、存在基因组DNA污染、试剂及环境被污染等。建议设置不含模板的对照(No template control, NTC),即反应体系中包含除模板以外的所有反应组分,根据样品孔和无模板对照孔熔解曲