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DH10B Electroporation-Competent Cell 20*50ul
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  • 货号 DH10B
  • 品牌 Boer ( 生产厂家 )
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  • 规格/包装 20*50ul/包
  • 单位 包
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商家描述 商家资质信息 产品评价(0)
1.0.1cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5
分钟，待其沥干水分，正置5分钟，使乙醇充分挥发，待乙醇挥
发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面0.5 cm以方
便盖上杯盖，冰中静置5分钟充分降温。
2.取-80℃保存的DH10B电击感受态细胞放入冰浴中融化，加入1
μl目的DNA (质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀立即
插入冰中。
A.测定转化效率使用1 μl 10 pg/μl的对照质粒pUC19；
B.对于连接产物，请用乙醇沉淀DNA后适量TE缓冲液 (10 mM
Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬，保证DNA浓度不超过100
ng/μl，体积不超过5μg/50μl感受态。
3.用200 μl枪头将感受态-质粒混合物快速移到电击杯中，避
免产生气泡，盖上杯盖。
4.启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8kV
(此为BioRad 电转仪推荐参数，使用者也可按所用电转仪推荐的
参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入
冰中。
5.立即 向电击杯中加入1ml不含抗生素的无菌培养基 S.O.C.，
混匀后转移到空50ml管中，并用1ml SOC轻柔冲洗电转杯并转移
到50ml管中，另补加3ml SOC培养基， 37℃，200 rpm复苏60分
钟。
6.5000rpm离心一分钟收菌，重悬后取100-200 μl涂布到含相
应抗生素的S.O.C培养基上。将平板倒置放于37℃培养箱过夜培
养13-17h。
注 意 事 项
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