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操作步骤:
1.样品处理
(1) 玻片预先用多聚赖氨酸或APES进行处理。
(2) 细胞涂片和冰冻切片：最重要的是及时固定。用4%多聚甲醛/0.01M PBS(PH7.0---7.6)室温下固定30—60分钟。0.01M PBS洗2分钟×2次。蒸馏水洗涤2分钟×2次。
(3) 组织：有条件时应及时固定。常规4%多聚甲醛/0.01M PBS(PH7.0---7.6)或10%中性缓冲福尔马林固定4小时以上，石蜡包埋。切片常规脱蜡入水（脱蜡务必干净）。
2. 标本片加0.01M TBS 1:200新鲜稀释Proteinase K 37℃消化1—15分钟,0.01M TBS洗2分钟×3次。(细胞涂片和冰冻切片一般不消化或消化10—60秒钟。新鲜石蜡切片消化5-10分钟。陈旧石蜡切片消化10-15分钟)。
3. 标本片加标记缓冲液(Labeling Buffer) 20μl/片,以保持切片湿润。按每张切片取TdT 和BIO-d-UTP各1μl，加入18μl标记缓冲液中，混匀。甩去切片上多余液体后加标记液，20μl/片。置样品于湿盒中，37℃标记2小时。
4. 0.01M TBS洗2分钟×3次。
5. 加封闭液50μl/片，室温30分钟，甩掉封闭液，不洗。
6. 用SABC稀释液1：100稀释SABC：取1mlSABC稀释液加SABC 10μl，混匀后50μl/片加至切片。37℃反应30分钟。0.01M TBS洗5分钟×4次。
7. 必要时可用 DAPI 染色液（货号 AR1176，AR1177）轻度复染，蒸馏水洗。抗荧光衰减封 片剂封片(可用甘油代替)。荧光显微镜观察。
1.样品处理
(1) 玻片预先用多聚赖氨酸或APES进行处理。
(2) 细胞涂片和冰冻切片：最重要的是及时固定。用4%多聚甲醛/0.01M PBS(PH7.0---7.6)室温下固定30—60分钟。0.01M PBS洗2分钟×2次。蒸馏水洗涤2分钟×2次。
(3) 组织：有条件时应及时固定。常规4%多聚甲醛/0.01M PBS(PH7.0---7.6)或10%中性缓冲福尔马林固定4小时以上，石蜡包埋。切片常规脱蜡入水（脱蜡务必干净）。
2. 标本片加0.01M TBS 1:200新鲜稀释Proteinase K 37℃消化1—15分钟,0.01M TBS洗2分钟×3次。(细胞涂片和冰冻切片一般不消化或消化10—60秒钟。新鲜石蜡切片消化5-10分钟。陈旧石蜡切片消化10-15分钟)。
3. 标本片加标记缓冲液(Labeling Buffer) 20μl/片,以保持切片湿润。按每张切片取TdT 和BIO-d-UTP各1μl，加入18μl标记缓冲液中，混匀。甩去切片上多余液体后加标记液，20μl/片。置样品于湿盒中，37℃标记2小时。
4. 0.01M TBS洗2分钟×3次。
5. 加封闭液50μl/片，室温30分钟，甩掉封闭液，不洗。
6. 用SABC稀释液1：100稀释SABC：取1mlSABC稀释液加SABC 10μl，混匀后50μl/片加至切片。37℃反应30分钟。0.01M TBS洗5分钟×4次。
7. 必要时可用 DAPI 染色液（货号 AR1176，AR1177）轻度复染，蒸馏水洗。抗荧光衰减封 片剂封片(可用甘油代替)。荧光显微镜观察。