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生物试剂
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Hoechst 33342,也称bisBenzimide H 33342 或HOE 33342,分子式为C27H28N6O·3HCl ,分子量MW561.93,CAS: 23491-52-3,是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Hoechst 33342 专一性地与双链DNA结合(优先结合AT),常用于细胞核染色。染色后可以用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342 的最大激发波长为346 nm(紫外激发),最大发射波长为460nm(蓝色荧光);Hoechst 33342 和双链DNA 结合后,最大激发波长为350nm,最大发射波长为461nm。另外,由于Hoechst 33342专一性结合DNA,不与RNA结合,样品无需使用RNase处理。与DAPI相比,Hoechst 33342具有更好的膜通透性,更适合于活细胞的染色。
Hoechst 33342和Hoechst 33258相比,Hoechst 33342对细胞的毒性作用更小一些,33258穿透能力较33342弱,染活细胞时容易被"泵出",也就是拒染。所以一般来说Hoechst 33258用于细胞固定后再染色,而Hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色。
本染色液为100×浓度,使用终浓度为1×,可直接用于活细胞或组织的细胞核染色,也可稀释后用于固定细胞或组织的细胞核染色。