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免冰浴快速转膜缓冲液(干粉)
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  • 货号 G2028-1L
  • 品牌 赛维尔/servicebio ( 经销商 )
  • CAS号
  • 规格/包装 1 L(干粉)*1
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产品简介

本产品是一种安全无害的用于Western Blot时湿转快速转膜的缓冲液,能高效快速地将蛋白转移到印迹膜上;可以使用甲醇或者乙醇,能在15-30 min内完成转膜过程。

安全无毒害:本产品不含有毒有害组分。

转膜缓冲液的转膜效果与传统转膜缓冲液一致或更优。

转膜快速、无需冰浴:使用快速转膜缓冲液时,在400 mA恒流转膜15-30 min即可将聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白转移至PVDF膜或硝酸纤维膜(NC膜)等印迹膜上,并且产热较传统转膜缓冲液更低。


储存与运输

常温运输与储存,24个月有效期。


操作步骤

1. 每袋免冰浴快速转膜缓冲液干粉溶解于600 mL纯水中,加入200 mL无水乙醇或甲醇,充分溶解混匀,然后加水定容至1000 mL(根据需求适当成倍配制);

2. 做好转印所需的三明治结构,从负极(黑色面)到正极(红色面)顺序为海绵、滤纸、凝胶、印迹膜、滤纸、海绵,然后转移至转印槽中,设定恒流400 mA,转膜时间15-30 min(此条件针对1.0 mm厚的凝胶,如凝胶厚度为0.75 mm,适当减少转膜时间;如凝胶厚度为1.5 mm,适当延长转膜时间)完成蛋白转膜。

免冰浴快速转膜缓冲液

恒流

分子量大小

推荐转膜时间

300 mA

20 kDa以下

20分钟

20-100 kDa

30分钟

100-150 kDa

50分钟

150 kDa以上

60分钟以上

400 mA

20 kDa以下

15钟

20-100 kDa

25分钟

100-150 kDa

45分钟

150 kDa以上

55分钟以上


注意事项

1. 本产品适用于Tris-glycine、Bis-Tris等体系蛋白凝胶的湿法转膜。

2. PVDF膜使用前需用无水乙醇或甲醇浸润30 s左右。

3. 30 min内的转膜无需冰浴,超过30 min的转膜建议冰浴。

4. 由于用于转膜的电源品牌和型号的不同,一方面最高电流差异较大,另一方面功率也会有加大差别;部分电源设定恒流为400 mA时,会超过最大功率出现过载保护,此时需适当调低电流,或者选用功率更大的电源。

5. 转膜时转膜缓冲液的温度、凝胶的参数(如厚度、丙烯酰胺浓度、离子浓度)、滤纸厚度、转膜缓冲液的体积、转膜缓冲液的使用次数都可能会影响电流和电压;如出现过载的情况请适当降低电流并延长转膜时间。

6. 本产品正常颜色为无色透明,如出现浅棕色或者黄褐色,应该及时丢弃。

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