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生物试剂
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碧云天的BeyoDesalt™ 6FF Midi脱盐柱，即BeyoDesalt™ 6FF Midi Desalting Column，是一种简单、快速、高效地使用Beyorose™ 6FF基质分离大分子量物质与小分子量物质的预包装即用型层析柱，俗称脱盐柱，主要用于去除病毒颗粒、大分子量蛋白质、超螺旋DNA、多糖等样品的盐离子、去垢剂、小分子染料、缓冲剂等杂质。本脱盐柱使用的填料为Beyorose™ 6FF，填料粒径为45-165μm，可分离分子量>400kDa的蛋白质或其它大分子样品，柱床体积为5.3ml，建议上样量为0.5-1.5ml，本产品适用于重力法或离心法。
本产品采用的是Beyorose™ 6FF基质，该基质是高度交联的6%琼脂糖(Agarose)，与Sepharose 6 Fast Flow的性能基本一致。本产品用于分离样品时，体积较大的大分子不能进入基质网状筛孔而被阻隔在基质凝胶之外，随着流动溶液沿着基质凝胶颗粒间的缝隙移动，下移速度较快，先被洗脱出柱；体积较小的分子或离子可以进入基质网状筛孔从而进入凝胶内部，随着流动溶液在凝胶颗粒的网孔内移动，因此小分子量物质在基质内停留时间更长，下移速度较慢，后被洗脱出柱，这种分离纯化方式被称为尺寸排阻层析(Size-exclusion chromatography, SEC)，也常被叫做分子筛层析(Molecular sieve chromatography, MSC)或凝胶过滤层析(Gel filtration chromatography, GFC) [1-2] (图1)。
图1. 碧云天BeyoDesalt™脱盐柱的工作原理图。
本产品的基本信息如下表:
| 基质(Matrix) | Beyorose™ 6FF |
| 填料粒径(Bead size) | 45-165μm |
| 分离范围(Exclusion limit) | Mw > 400kDa (Mw: molecular weight, also mentioned as Mr: relative molecular mass) |
| 建议上样量(Recommended sample volume) | 0.5-1.5ml |
| 样品稀释倍数(Sample dilution) | 1.3-3 |
| 柱床体积(Column volume, CV) | 5.3ml |
| 柱床尺寸(Column dimensions) | 1.3×6.6cm |
| 柱床内径(Column i.d.) | 12.7mm |
| 化学稳定性(Chemical stability) | All commonly used buffers; Avoid oxidizing agents |
| pH稳定性(pH stability) | pH2-13 |
| 使用方法(Operation) | Gravity or Spin |
| 保存条件(Storage) | 20% ethanol at 4-30ºC |
碧云天提供多种类型的脱盐柱，不同类型脱盐柱的比较和选择请参见下表：
| Product Name | BeyoDesalt™ | |||||||
| Classification | Multi Spin (96 well) | Spin | Mini | Midi | Max | Superfine | Fine | |
| Diagram |
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| Matrix |
Beyodex™ G-25 M Beyorose™ 6FF |
G-25 M 6FF |
G-10 G-25 M 6FF |
G-10 G-25 M 6FF |
G-25 M 6FF |
G-25 SF 6FF |
G-25 F 6FF |
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| Resolution | ★★★ | ★★★★★ | ★★★★ | |||||
| Spin*** | Sample volume | 70-130μl | 0.2-0.5ml | 0.75-1.5ml | 1.75-2.5ml | Not Applicable | ||
| Elution volume | 70-130μl | 0.2-0.5ml | 0.75-1.5ml | 1.75-2.5ml | ||||
| Dilution factor | 1 | |||||||
| Gravity | Sample volume | Not Applicable |
0.1-0.3ml* 0.1-0.5ml** |
0.4-1ml* 0.5-1.5ml** |
1-2.5ml | |||
| Elution volume | 1ml | 2ml | 3.5ml | |||||
| Dilution factor | 2-10 | 1.3-3 | 1.5-3.5 | |||||
| Syringe | Sample volume | Not Applicable | Not Applicable | 0.25-1.5ml | Not Applicable | |||
| Elution volume | 1-2ml | |||||||
| Dilution factor | 1.3-4 | |||||||
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AKTA System |
Sample volume | Not Applicable | Not Applicable | 0.25-1.5ml | 2-20ml | |||
| Elution volume | 1-2ml | 10-30ml | ||||||
| Dilution factor | 1.3-4 | 1.5-5 | ||||||
|
Number of columns used in series |
Not Applicable | 1-5 columns | ||||||
