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基因型
Agrobacterium rhizogenes (carbR,strR,rifR ) pRi1193 (agropine type)
产品说明
发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。Ar.1193发根农杆菌含有pRi1193农杆碱型Ri质粒,特别适合豆科,茄科植物毛状根的诱导,同时具有羧苄青霉素,链霉素,利福平抗性。本公司生产的Ar.1193化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,pCAMBIA2301质粒(12739bp,KanR)检测转化效率>104 cfu/μg DNA。
常规操作方法
1.取-80℃保存的Ar.1193发根农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2. 每100μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3. 冰浴中拿出放室温,加入700μl 无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2小时。
4. 6000 rpm 离心一分钟收菌,留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 TY平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3 天