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INVSc1 感受态细胞
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  • 货号 YC1050S
  • 品牌 上海唯地 ( 经销商 )
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  • 规格/包装 10×100ul
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基因型 MATa his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52/MATα his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52  产品说明 INVSc1菌株是专门用来做重组蛋白表达的宿主酵母,pYES2质粒与INVSc1酵母配套使用,激活pYES2质粒的GAL1启动子的转录进而启动下游重组蛋白的表达。INVSc1为合子型,可直接通过PEG/LiAc将pYES2质粒转化进入INVSc1细胞内。质粒pYES2的筛选标志为URA,可用SD-URA板进行筛选。INVSc1感受态细胞经特殊工艺制作,-80℃可保存三个月,pYES2质粒(5857bp,AmpR)检测转化效率>104 cfu/μg DNA。 操作方法 1. Carrier DNA 的预处理:将Carrier DNA 插入95℃金属浴5 min或插入浮漂中95℃水浴3 min,加热后快速插入冰中。 2. 取100 µl冰上融化的INVSc1感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒2-5 µg,预处理后的Carrier DNA 10 µl,PEG/LiAc 500 µl并吸打几次混匀,30℃水浴30 min (15 min时翻转6-8次混匀)。 3. 将管放42℃水浴15 min (7.5 min时翻转6-8次混匀)。 4. 5000 rpm离心 40 s弃上清,ddH2O 400 µl 重悬,离心 30s弃上清。 5. ddH2O 50 µl重悬,涂板(筛选平板用:SD-U medium板),29℃培养48-96 h。
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