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BY4741 感受态细胞
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  • 货号 YC1060S
  • 品牌 上海唯地 ( 经销商 )
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  • 规格/包装 10×100ul
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基因型 MATa his3Δ1 leu2 met15Δ ura3-52 产品说明 BY4741菌株来源于酿酒酵母原始菌株——S288C,是实验室的常用菌株,为配子MATa型,广泛应用于钠,钾离子平衡;细胞抗盐;各种金属离子的吸收;重金属毒性;各种糖类,碳源对真核生物细胞生长的影响;过氧化物,超氧化物的吸收与运输的研究中。BY4741酿酒酵母为组氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸 、尿嘧啶缺陷型菌株,可直接通过PEG/LiAc将pYES2质粒转化进入BY4741细胞内。质粒pYES2的筛选标志为URA,可用SD-URA板板进行筛选。唯地生物生产的BY4741感受态细胞经特殊工艺制作,-80℃可保存三个月,pYES2质粒(5857bp,AmpR)检测转化效率>103 cfu/μg DNA。 操作方法 1.Carrier DNA 的预处理:将Carrier DNA 插入95℃金属浴5 min或插入浮漂中95℃水浴3 min,加热后快速插入冰中。 2. 取100 µl冰上融化的BY4741感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒1-3 µg,预处理后的Carrier DNA 10 µl,PEG/LiAc 500 µl并吸打几次混匀,30℃水浴30 min (15 min时翻转6-8次混匀)。 3. 将感受态移到42℃水浴15 min (7.5 min时翻转6-8次混匀)。 4. 5000 rpm离心 40 s弃上清,ddH2O 400 µl 重悬,离心 30s弃上清。 5. ddH2O 50 µl重悬,涂板,29℃培养48-96 h。
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