会员登录.getTime()%>){kind=logo}
购物车()
首页>
生物试剂
成功收藏产品
碧云天的DEAE Agarose 6FF (DEAE琼脂糖凝胶)，也称DEAE阴离子交换凝胶、DEAE阴离子交换树脂、DEAE阴离子交换填料、DEAE阴离子交换基质、DEAE弱阴离子交换凝胶、DEAE蛋白纯化凝胶、DEAE Ion Exchange Agarose或DEAE Ion Exchange Resin，是由二乙胺基乙基(Diethylaminoethyl, DEAE)与高度交联、高流速(Fast Flow)的6%琼脂糖共价偶联(简称6FF)而成的一种弱阴离子交换介质，可快速、高效、灵敏、特异性地与带负电荷的生物大分子结合，主要用于带负电荷的天然或重组蛋白、抗体、多肽和核酸的分离纯化。本产品可用于非装柱的离心式直接纯化，也同样可用于制备成预装柱以用于AKTA等设备中压或低压条件下纯化带负电荷的蛋白、多肽或核酸。
离子交换层析(Ion-exchange chromatography, IEC)是一种有效的生物分子分离纯化方法，利用不同生物分子在特定条件下带有的电荷的性质和多少的差异，通过正负电荷间的相互作用进行分离[1]。离子交换介质由三部分组成：①网状基质(Matrix)：即琼脂糖、葡聚糖或纤维素凝胶等具有交联结构的高分子骨架；②固定在基质上的配基(Ligand)：该配基，也称功能基团，是荷电基团，决定了离子交换层析介质的性质，配基带有负电荷为阳离子交换介质，可结合带有正电荷的蛋白质，反之功能基团带有正电荷为阴离子交换介质，可结合带有负电荷的蛋白质；③与配基带相反电荷的离子(Counter ion)，也称为平衡离子：该离子可以可逆的与配基相结合。
碧云天的离子交换填料主要包括强酸性阳离子交换填料SP Agarose 6FF (P2067)、弱酸性阳离子交换填料CM Agarose 6FF (P2069)、强碱性阴离子交换填料Q Agarose 6FF (P2071)和弱碱性阴离子交换填料DEAE Agarose 6FF (P2073)，四种填料的比较和选择请参见下表。
| Product | SP Agarose 6FF | CM Agarose 6FF | Q Agarose 6FF | DEAE Agarose 6FF |
| Cat No. | P2067 | P2069 | P2071 | P2073 |
| Ion exchanger type | Strong cation | Weak cation | Strong anion | Weak anion |
| Ligand |
-(CH2)3SO3- (Sulphopropyl/ 磺丙基) |
-O-CH2COO- (Carboxymethyl/ 羧甲基) |
-N+(CH3)3 (Quaternary ammonium/季铵基) | -O-CH2CH2-N+(C2H5)2H (Diethylaminoethyl/二乙基氨基乙基) |
| Ionic capacity | ~0.18-0.25mmol H+/ml settled gel | ~0.09-0.13mmol H+/ml settled gel | ~0.18-0.25mmol Cl-/ml settled gel | ~0.11-0.16mmol Cl-/ml settled gel |
| Binding capacity | >90mg lysozyme/ml settled gel | >50mg lysozyme /ml settled gel | >50mg BSA/ml settled gel | >90mg ovalbumin /ml settled gel |
| pH stability | 3-14 | 2-14 | 2-14 | 2-14 |
| Unstable chemicals | Oxidizing agents, cationic detergents | Oxidizing agents, anionic detergents | ||
| Stable chemicals | Stable to all commonly used aqueous buffers; 1M NaOH; 8M urea; 6M guanidine hydrochloride; 1M acetic acid; 75% ethanol; 30% Isopropanol. | |||
| Average particle size | ~90μm | |||
| Flow velocity | Recommended：300-600cm/h; Maximum：700cm/h | |||
| Working temperature | 4-30ºC | |||
| Autoclavable | 121ºC (pH7, 30min) | |||
| Maximum pressure | 0.3MPa | |||
| Application | Purification for protein、antibody or other biomacromolecule | |||
| Storage condition | 4ºC, 20% ethanol (SP Agarose 6FF: 0.2M Sodium acetate contain 20% ethanol) | |||
本产品是以DEAE作为功能基团、高度交联的琼脂糖为高分子基质的阴离子交换填料。DEAE是一种弱碱性的叔胺基团，具有极佳的稳定性，中心N原子带有正电荷，可以吸附样品中带负电荷的蛋白质等，所以这些带负电荷的蛋白质等被留在柱子上，然后通过提高洗脱液中的盐浓度等方法，将吸附在柱子上的带负电荷的蛋白质等洗脱下来，从而实现带负电荷的生物大分子的分离纯化。本产品采用高度交联的琼脂糖是以Beyorose™ 6FF为基质，该基质是高度交联的6%琼脂糖(Agarose)，与Sepharose 6 Fast Flow的性能基本一致。
DEAE琼脂糖凝胶在生物医学领域内应用非常广泛，可以特异性地纯化生物制药或生物工程下游的蛋白、多肽、抗体等；或分离细胞和植物中多糖物质，多用于分离中性、酸性和粘多糖等物质等；还可用于分离大量的基因组DNA以及细菌、细胞裂解液中质粒DNA。本产品可用于非装柱的离心式直接纯化，也可用于装柱后纯化。本产品用于非装柱的离心式直接纯化实验流程请参考图1。
图1. 碧云天DEAE Agarose 6FF (DEAE琼脂糖凝胶) (P2073)用于非装柱的离心式直接纯化的实验流程图。
本产品结合量容量高。与同类的很多产品相比，本产品具有非常高的结合容量，对复杂样品中带负电荷的蛋白、多糖和核酸等生物分子可以快速进行分离纯化。每毫升DEAE Agarose 6FF沉淀可结合0.11-0.16mmol Cl-，可结合约90mg卵清蛋白。本产品用于BSA的结合效果参考图2。
图2. 碧云天DEAE Agarose 6FF (DEAE琼脂糖凝胶) (P2073)用于BSA的结合效果图。样品1为Input，即BSA；样品2为本产品结合BSA后经推荐的洗脱缓冲液(Elution Buffer)洗脱后得到的样品；样品3为本产品结合BSA后经SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X) (P0015A)洗脱后得到的样品。图中约66kDa处的条带为BSA。图中可见，仅本产品处理后，分子量小于66kD处的蛋白条带显著减少。实际结果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。
本产品特异性强。本产品可特异性地结合带负电荷蛋白、多肽、多糖和核酸等生物大分子等，获得的产物纯度高，可进一步用于Western、ELISA、质谱分析等一系列后续的分析测试。
本产品流速快，适用性广。本产品性能稳定，可以快流速操作，可适用于实验室规模制备和生物制药、生物工程的大工业化制备，也可对接常用的层析设备。
本产品保存在20%乙醇中，凝胶沉淀体积为总体积的50%，即例如10ml包装体积中含有5ml凝胶沉淀体积。
保存条件：4ºC保存，两年有效。
注意事项：本产品使用前须混合均匀，即颠倒若干次使琼脂糖凝胶混合均匀，混匀操作须轻柔，不宜剧烈涡旋震荡等，避免琼脂糖凝胶破碎。
在纯化时，建议设置阳性和阴性对照组。
蛋白样品收集后宜尽快完成纯化工作，并应始终放置在4ºC或冰浴，以减缓蛋白降解或变性。为有效抑制蛋白降解，可以在蛋白样品中添加适量的蛋白酶抑制剂混合物，例如碧云天的蛋白酶抑制剂混合物(通用型, 100X) (P1005/P1006)、蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(通用型, 质谱兼容, 50X) (P1048/P1049)、蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 100X) (P1010/P1011)、蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 50X) (P1050/P1051)等。
如果离心不能完全除去蛋白样品中的不溶物，可以将样品溶液用0.45μm的滤膜过滤。
高浓度的DTT、巯基乙醇等对本产品与目标分子的结合可能有一定影响，且本产品不耐受阴离子去垢剂如SDS、脱氧胆酸钠等以及氧化剂，但Western及IP细胞裂解液(P0013)或NP-40裂解液(P0013F)等都完全适用。碧云天生产的不同裂解液的主要特点和差异，以及如何选择裂解液可参考我们的相关网页：http://www.beyotime.com/support/lysis-buffer.htm。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
