Lenti-NFAT-TA-Luc-EF1α-Puro (10^8TU/ml, 报告基因慢病毒)是碧云天自行研发的一种可以在大多数哺乳动物细胞(包括原代细胞和干细胞)中表达NFAT报告基因并组成性表达嘌呤霉素(Puromycin)抗性基因的重组慢病毒。本产品可用于高灵敏度地检测NFAT的激活水平。本产品带有嘌呤霉素(Puromycin)抗性基因，感染细胞后可以使用嘌呤霉素筛选稳定表达细胞株。

活化T细胞核因子(Nuclear factor of activated T cells, NFAT)家族包含NFATc1、NFATc2、NFATc3、NFATc4和NFATc5，是一类在免疫反应中起重要作用的转录因子[1]。

EF1α (EF1a)启动子是一种来源于延伸因子1α (Elongation factor 1 alpha, EF1α)基因的强哺乳动物表达启动子，可在多种细胞中稳定驱动其下游基因的组成型表达，也可以用于干细胞、原代细胞、造血细胞等。

萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出波长为560nm左右的生物萤光(Bioluminescence) [2]。生物萤光可以通过化学发光仪(Luminometer)或液闪测定仪进行测定。通过萤光素和萤光素酶这一生物发光体系，可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。本病毒中的萤火虫萤光素酶编码进行了改进，确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达。

慢病毒感染细胞后会将目的基因随机整合到基因组DNA上，因而可以长期稳定地表达目的蛋白，并且几乎可以感染所有哺乳动物细胞，在很多不分裂的细胞中也可以长期稳定表达，广泛应用于细胞和动物实验。

本产品表达嘌呤霉素抗性基因，因此本产品感染培养的细胞后可以使用嘌呤霉素(ST551)筛选稳定表达的细胞株以用于后续研究。

碧云天的Lenti-NFAT-TA-Luc-EF1α-Puro是复制缺陷型慢病毒。其3' LTR的增强子功能发生缺失，形成了自失活(Self-inactivating) 3' LTR，在感染普通的细胞后不能进行复制和扩增，从而有效降低了本产品在活体生物中的风险。

本产品的滴度不低于10^8TU/ml，适合细胞实验或活体动物实验。TU, transduction unit，即转导单位。TU通过本产品梯度稀释后感染HEK293T细胞后抽提细胞基因组DNA进行qPCR测定获得，以确定具有生物活性的病毒颗粒数量。MOI (Multiplicity of Infection)是病毒感染细胞时，病毒数量与细胞数量的比值。使用10^8TU/ml的本产品，如果按照5 MOI感染6孔板的细胞，每孔50万细胞计算，每100μl共可以感染4个孔；如果按照5 MOI感染24孔板的细胞，每孔10万细胞计算，每100μl共可以感染20个孔。如果MOI值提高，那么相应可以感染的孔数会减少；如果MOI值下调，那么相应可以感染的孔数会增加。

-80℃保存，一年有效。-20℃保存，两周内有效。4℃保存，3天内有效。

反复冻融会降低病毒滴度，如有必要请在收到本产品后分装保存。分装时必须在冰浴上进行。病毒融解后，如果在一周内使用，可以放置于4ºC，但须注意4ºC存放时间越长，滴度下降越明显。如果-80ºC保存时间超过一年，可能会导致滴度下降，此时建议重新测定病毒滴度。

本产品使用前请仔细阅读附录1《慢病毒使用安全规范》。本产品生物安全等级为Biosafety Level 2 (BSL-2)，在按照常规的微生物实验操作要求进行操作(Standard microbiological practices)的基础上，还需要注意限制接触、生物危害提示、显著的警示标识、并制定相应的安全规范。

病毒操作中应注意有效防护，绝对禁止在生物安全柜内有任何皮肤直接暴露的情况。实验完成后，请及时清洗双手。严禁直接接触病毒，如意外接触，请及时用清水冲洗，并适当用70%乙醇对皮肤进行消毒。

任何接触过病毒的材料、试剂、样品，应经消毒处理，可以采用1%的SDS溶液、或84消毒液(1:20)浸泡30分钟以上，或121ºC高压灭菌30分钟。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。