商家描述
商家资质信息
产品评价(0)
本产品是将 PCR 反应所需的 Taq DNA 聚合酶、dNTPs、Mg
2+、反应缓冲液以及稳定剂等成分预先配制成 2 倍浓度的混合溶液。适用于超快速 PCR 反应、大规模基因检测,以及GC含量高,二级结构复杂的目的片段扩增。短片段或者简单模板如质粒模板可以尝试5 s/kb 延伸速度并采用较少循环数以进一步缩短 PCR 时间;长片段(≥3 kb)或者复杂模板产量较低时可以采用 15-30 s/kb 延伸速度或者采用较多循环数。使用本试剂扩增得到的PCR 产物3´端有一突出"A"碱基,可直接克隆于 T 载体中。 产品特点:
本产品具有快速简便、灵敏度高、稳定性好等优点,使用时只需加入DNA 模板和引物,并用水补足体积,可最大限度地减少人为误差、节约时间、降低污染几率。本品为含染料的PCR 预混产品,在反应完成后不需添加 DNA 上样缓冲液即可直接进行电泳;也可经过纯化处理,用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。红色染料可指示电泳进程。使用方法:
操作示例:以 50 µL PCR 反应体系为例:
注:每管样品应仔细混匀并离心后开启,所有 PCR 操作过程应在冰上进行。
1. 按照下表配制 PCR 反应体系:
组分 体积
DNA 模板* X µL
2×Fast Taq plus Master Mix 25 µL
正向引物(10 μM) 2.5 µL
反向引物(10 μM) 2.5 µL
水 补足至 50 µL
2. 快甩离心将反应液收集到管底。
3. PCR 仪如果没有热盖加热的话,补加 25µL 矿物油。
4. PCR 仪程序设置:
步骤 温度 时间 循环数预变性 95℃ 2 min 1
变性 95℃ 15 s
退火 50-72℃ 15 s 25-35
延伸 72℃ 15 s/kb** 终延伸 72℃ 5 min 1
注:*模板量:50-100 ng 基因组 DNA,1-30 ng 质粒,或 1-2 µL RT-PCR 反应后的 cDNA。