碧云天的线粒体绿色荧光染色试剂盒(Mito-Tracker Green)，即Mitochondrial Green Fluorescence Staining Kit with Mito-Tracker Green，是基于线粒体绿色荧光探针Mito-Tracker Green主要用于活细胞线粒体特异性荧光染色的试剂盒。本试剂盒适用于荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等荧光检测设备。本试剂盒也可用于固定细胞的线粒体染色，但染色效果会略有下降。本试剂盒不能染色后再进行固定。

Mito-Tracker Green为采用carbocyanine进行了荧光标记的一种Mito-Tracker，也称Benzoxazolium, 2-[3-[5,6-dichloro-1,3-bis[[4-(chloromethyl)phenyl]methyl]-1,3-dihydro-2H-benzimidazol-2-ylidene]-1-propenyl]-3-methyl-, chloride。分子式为C34H28Cl5N3O，分子量为671.88，CAS number为201860-17-5，可以用作线粒体特异性的荧光探针[1]。和Mito-Tracker Deep Red 633、Mito-Tracker Deep Red FM、Rhodamine 123或JC-1相比，Mito-Tracker Green对于线粒体的染色不依赖于线粒体膜电位。

由于Mito-Tracker Green对于线粒体的染色不依赖于线粒体膜电位，因此可对固定后的细胞或组织进行染色，但荧光可能会有一定程度的下降或弥散；而活细胞染色后，再经过固定后会导致荧光消失。本试剂盒对HeLa细胞的染色效果参考图1。

图1.碧云天线粒体绿色荧光染色试剂盒(Mito-Tracker Green) (C1996)对于HeLa细胞(人宫颈癌细胞)的染色效果图。经本试剂盒中Mito-Tracker Green染色的HeLa活细胞线粒体呈现绿色荧光(图B)，Hoechst 33342染色的HeLa细胞的细胞核呈蓝色荧光(图C)，线粒体绿色荧光和细胞核蓝色荧光的叠加(Merge)效果见图D。本图仅作参考，实际检测效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异。

Mito-Tracker Green最大激发光波长为490nm，最大发射波长为516nm，呈绿色荧光，Mito-Tracker Green的结构式以及激发光谱和发射光谱参考图2。

图2.Mito-Tracker Green的结构式(左)以及激发光谱和发射光谱(右)。

对于96孔板中的样品，按照每孔使用100μl染色液计算，本试剂盒的小包装和中包装可以进行500次和2000次检测；如果用于流式细胞仪检测，按照每个样品的检测体系体积为0.5ml时，本试剂盒的小包装和中包装可以进行100次和400次检测；对于6孔板中的贴壁培养细胞样品，按照每孔使用1ml染色液计算，本试剂盒的小包装和中包装可以进行50次和200次检测。

-20ºC保存，一年有效。其中Mito-Tracker Green (1000X)和Hoechst 33342 (1000X)须避光保存。

Mito-Tracker Green (1000X)反复冻融对于其检测效果有影响，请适当分装，避免反复冻融。

染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加以及线粒体形态发生显著变化。

活细胞染色后可以立即进行观察或检测，再经过固定后会导致荧光消失。如需染色后再固定，推荐线粒体深红色荧光染色试剂盒(Mito-Tracker Deep Red FM) (C1998)。但本试剂盒可以对固定后的细胞或组织进行染色，但荧光染色效果可能会有一定程度的下降或弥散。如需进一步通透处理，推荐使用免疫染色通透液(Saponin) (P0095)。

对于微量的液体，每次使用前先离心数秒钟，使液体充分沉降到管底。

荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

需自备盖玻片和载玻片(可以向碧云天订购)。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。