
二甲基亚砜 DMSO (细胞培养级)
二甲基亚砜,英文名称DMSO。常用于溶解试剂。过滤除菌时不能使用醋酸纤维素膜,而应该使用尼龙膜。二甲基亚砜(DMSO)是一种含硫有机化合物,分子式为(CH3)2SO,常温下为无色无臭的透明液体,是一种吸湿性的可燃液体。具有高极性、高沸点、热稳定性好、非质子、与水混溶的特性,能溶于乙醇、丙醇、苯等大多数有机物,被誉为“溶剂”。
二甲基亚砜 DMSO (细胞培养级)
不能使用PS、PVC、PC材料的容器,而应该使用LDPE、HDPE、PP材料的容器。
DMSO属于非质子极性溶剂,常用于化学反应、pcr反应以及在细胞、组织和器官的保存中用作玻璃化低温冷冻防护剂。DMSO用于细胞冷冻培养基内,可以保护细胞免受冰晶引起的机械性损伤。它也可以用于主培养、亚培养、重组异倍体、杂交瘤等系列细胞株,胚胎干细胞(ESC)和造血干细胞的冷冻保藏。另外常常与BSA或FBS混合使用。
用 途:
(1)DMSO广泛应用在人、动物细胞株及细菌噬菌体λ的低温防护中,制备DMSO溶液用来冷冻细胞的步骤如下:
1)配制冷冻培养基:含有细胞培养用培养基、10-20% 血清和5-10% DMSO;
2)用胰酶或其他合适的方法消化贴壁细胞;(细胞好处于对数增长期)
3)低速离心(4 °C,250 × g, 10min)收集细胞,吸去培养基;
4)用冷冻培养基悬浮细胞,使细胞密度为106 -107 cells/ml;
5)平均分配细胞,装入冻存管内;
6)依照标准冻存程序冷冻细胞,冻存在-70 °C 或更低的温度内;
(2)细胞融合时,40-50% PEG 溶液内加入10% DMSO;
(3)有文献报道DMSO作为缓冲液的成分,用于以下的实验:Poly(A+)RNA的纯化, E. coli感受态细胞转化、PCR反应、cDNA文库的扩增、DNA测序、DEAE-葡聚糖介导的细胞转染、聚凝胺介导的DNA转染;
(4)有相应的程序描述到用DMSO回收膜过滤后的DNA,用于接下来的PCR扩增反应;