技术服务:基因敲除株筛选、荧光标记、STR鉴定、配套培养基、耐药株筛选等(根据实际时间段的人力安排或者技术要求做评估选择所承接的实验课题)。
更多细胞操作方法、注意事项可直接咨询技术人员;
肿瘤细胞组织块培养法:
1):将取得的瘤组织去除脂肪、结缔组织及坏死部分;
2):用Hanks液在平皿中洗3次,剪碎组织,切成1-2mm3小块,接种于培养瓶或皿中;
注意:事先涂有鼠尾胶原。37℃ 5%或加盖瓶塞在普通恒温箱中培养。
Renca细胞复苏
-
从液氮罐中取出Renca细胞冻存管,并立即放入37℃水浴中,轻轻摇动,直至Renca细胞完全融化(约1-2分钟)。
-
将融化后的Renca细胞转移至含10 mL预热培养基的离心管中,轻轻混匀。
-
以1000 rpm离心4分钟,去除上清液。
-
重新悬浮Renca细胞于5 mL新鲜培养基中,并将其转移至T25培养瓶中。
-
将培养瓶置于37℃、5% CO₂的培养箱中培养。
Renca细胞传代
-
传代时机: 当Renca细胞密度达到80%-90%时进行传代。
-
弃去旧培养基,用不含钙、镁的PBS洗涤Renca细胞1-2次。
-
加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,轻轻摇匀,放入37℃培养箱中消化1-3分钟。
-
当Renca细胞大部分变圆并脱落时,迅速加入培养基终止消化。
-
将细胞悬液转移至离心管,1000 rpm离心4分钟,去除上清液。
-
重新悬浮Renca细胞于适量培养基中,并按1:2比例分配至新的培养瓶或培养皿中。
Renca细胞冻存
-
当Renca细胞密度达到80%-90%时,收集细胞并用PBS洗涤。
-
离心去除上清后,将Renca细胞重新悬浮于冻存液中(60%培养基 + 30% FBS + 10% DMSO)。
-
将Renca细胞分装至冻存管中,标记清楚后,先置于-80℃冰箱冷冻过夜,然后转移至液氮罐中长期保存。
详情见官网:http://www.feifanjcrz.com/?m=home&c=View&a=index&aid=492
大鼠肝细胞瘤细胞(H-4-II-E)
人回盲肠癌细胞(HCT-8)
人舌鳞癌细胞(HN6)
人结肠癌细胞(KM12)
小鼠小肠上皮细胞(MODE-K)
人食管鳞癌细胞(KYSE410)
人肝星状细胞(LX-2)
人舌鳞癌细胞(CAL-27)
人胃癌细胞(MGC-803)
人胆管癌细胞(Hucct1)
人结肠癌细胞(Caco2)
人高转移性肝癌细胞(MHCC97H)
人结肠腺癌细胞(SW1116)
人正常肠上皮细胞(HICE-6)
猪回肠上皮细胞(IPI-FX)