本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，实验时长4小时。试剂盒中的酶标板已预先包被抗CNN3的抗体。将标准品、适度稀释的待测样品分别加入相应孔中,孵育后洗去未结合的成分。加入生物素-检测抗体，生物素-检测抗体与已经结合在包被抗体上的CNN3相结合。洗去未结合的成分后，加入HRP-链霉亲和素(SABC)。再洗去未结合的成分，加入TMB显色底物，TMB 在辣根过氧化物酶(HRP)的催化下呈现蓝色，加反应终止液后变成黄色。用酶标仪在 450 nm 波长测 OD 值。通过绘制标准曲线计算样品中CNN3的浓度。目的物质的浓度与OD450值之间呈正比。
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