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产品描述
萤火虫萤光素酶(Firefly luciferase)是一种分子量约为61 kDa的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,能够催化萤光素(luciferin)氧化成oxyluciferin,在氧化的过程中会发出波长为560 nm左右的生物萤光。海肾萤光素酶(Renilla luciferase)是一种分子量约为36 kDa的蛋白,在氧气存在的条件下,可以催化腔肠素(coelenterazine)氧化成coelenteramide,在氧化的过程中会发出波长为480nm左右的生物萤光。两种生物萤光都可通过化学发光仪进行测定。检测原理如图所示:
图1:萤火虫和海肾萤光素酶检测原理图
通常将目的基因的5´UTR或启动子克隆至Firefly Luciferase的上游,或3´UTR克隆至Firefly Luciferase的下游,通过检测萤火虫萤光素酶的量来检测启动子或调控元件的转录调控作用。Renilla Luciferase作为内参,来消除细胞数量、转染效率等的差异。Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit首先以萤光素为底物来检测萤火虫萤光素酶报告基因的活性,之后在淬灭该萤光反应的同时,以腔肠素为底物检测海肾萤光素酶报告基因的活性。该试剂盒具有灵敏度高的特点。
运输和保存方式
干冰运输。 -20℃保存,有效期1年。
萤火虫萤光素酶反应工作液和海肾萤光素酶反应工作液现配现用,且不能反复冻融,建议分装-20℃或-80℃分装保存。