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生物试剂
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所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、可调式移液器、低温台式离心机、研钵、冰和蒸馏水。
线粒体复合体 I 活性测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂
浪费！
1、线粒体制备（提示：整个线粒体的提取过程须保持 4℃低温环境）：
① 称取约 0.1g 组织或收集 500 万细菌/细胞，加入 1mL 试剂一，用冰浴匀浆器或研钵匀浆，转移至离
心管后于 4℃×700g 离心 10min（若漂浮有脂肪，可用枪头去除）。
② 弃沉淀，上清液移至另一离心管中，4℃×12000g 离心 10min。沉淀即为提取的线粒体，用作第④步
操作。
③ (选做) 上步得到的上清液即为胞浆提取物，可作为样本用于测定从线粒体泄漏的线粒体呼吸链复
合体 I，用于判断线粒体提取效果。
④ 在沉淀（线粒体）中加入200μL试剂二和2μL试剂三，超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声
3s，间隔10秒，重复30次），液体置于冰上用于线粒体复合体I酶活性测定。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取，或按照细菌/细胞数量
（10 4）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
