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引言脱颗粒,即细胞质颗粒的分泌,是白细胞(例如嗜碱性粒细胞,中性粒细胞,嗜酸粒细胞和肥大细胞)炎症反应的关键步骤。 除组胺外,这些分泌颗粒还含有许多促炎介质,包括肝素、细胞因子、趋化因子和许多蛋白酶(Hallgren,2001)。 类胰蛋白酶是一种四聚体丝氨酸蛋白酶,已成为肥大细胞颗粒的主要成分,占来自肺、结肠和皮肤组织的肥大细胞总蛋白的20%(He,2004;He,1998;Schwartz,1986)。 由于类胰蛋白酶几乎完全储存在肥大细胞中,因此它是肥大细胞活化的常用指标,也是过敏性疾病中治疗性干预的靶标。 Chemicon肥大细胞脱颗粒检测试剂盒提供了一种快速、有效和灵敏的系统,用于评估细胞裂解物、上清液中的类胰蛋白酶活性或用于抑制剂筛选。 检验原理Chemicon′肥大细胞脱颗粒检测试剂盒为测定类胰蛋白酶活性提供了一种简单方便的方法。 该测定基于从标记的底物tosyl-gly-pro-lys-pNA裂解后发色团对硝基苯胺(pNA)的分光光度法检测。 然后可以使用分光光度计或微量滴定板读数器在405 nm处定量游离pNA。 提供pNA标准品作为比较对照。钙离子载体A23187(钙霉素)包含在样品脱颗粒诱导试剂盒中。 钙霉素是人肥大细胞释放类胰蛋白酶的一种有据可查的诱导剂(2,3)。 包括类胰蛋白酶抑制剂鱼精蛋白作为用于筛选目的的测试抑制剂。 鱼精蛋白是一种强效肝素拮抗剂,可竞争性结合肝素(肥大细胞类胰蛋白酶的一种重要稳定因子)(Hallgren,2001;Schwartz,1986)。 已证明鱼精蛋白可抑制人和小鼠类胰蛋白酶(Hallgren,2001)。 试剂盒′分析缓冲液含有用于稳定类胰蛋白酶的肝素。,官网链接:https://www.sigmaaldrich.cn/product/mm/imm001
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